國內(nèi)兔ELISA試劑盒乙肝兩對半試劑廠家較多;不同廠家出產(chǎn)的試劑靈敏度與特異性存在一定的差別，資料顯示，不同廠家試劑的特異性和敏感性分別為 89.4%—99.3%,78%—89%存在較大差異。有的廠家酶標板孔間A值差大于15%;標記酶的活性及顯色液的穩(wěn)定比較差。使用質劣的試劑必然導致結果的假陽性或假陰性。因此。選擇高質量的試劑是保證結果準確的關鍵之一。
? 選擇試劑時應選擇靈敏度高、特異性好、穩(wěn)定性好、批間差小、操作方便省時的優(yōu)良檢測試劑，國家參比實驗室每年對各廠家的試劑進行質量評估并定期公布評估結果，可作為選擇試劑的主要依據(jù)。
? 要注意試劑的批號和出廠日期，雖然試劑的有效期多為 1年。選擇剛出廠。
兔ELISA試劑盒不同廠家的試劑不能混用。
不同方法學的檢測試劑，會使兩對半結果出現(xiàn)一些不同。例如：在實際工作中常用 ELISA檢測HBsAg結果為陰性，而電化學發(fā)光檢測為陽性。除方法學的靈敏度外;還存在使用單抗或多克隆抗體試劑的差別。單抗對變異抗原或亞型乙肝標志物檢測存在差異，建議試劑廠家對劑的制備應該考慮亞型及型濃度的問題。
3、操作技術的影響
操作過程的控制：
⑴ 嚴格按照試劑說明書進行操作。操作前將試劑在室溫下平衡30～60min。
⑵ 加樣后及時放人孵箱。標本較多時，要分批操作。按說明步驟嚴格控制操作時間，防止孵育時間人為延長，導致非特異性結合緊附于反應孔周圍，難以清洗*。
(3)封板溫育時，各孔一定要封嚴，防止陽性標本的液體蒸發(fā)，產(chǎn)生周邊現(xiàn)象從而導致“花板"的出現(xiàn)。
(4)用洗板機洗板時，保證洗液注滿各孔，洗板針暢通，洗完板后在吸水紙(選擇干凈、無或少塵的吸水材料)上輕輕拍干：還要防止針口有纖維蛋白或異物，這些異物在洗板的過程中易產(chǎn)生拖帶現(xiàn)象而導致“花板"的出現(xiàn)。
(5)合理安排檢測量，兔ELISA試劑盒以免反應板過多造成洗板等待時間長。
(6)加酶試劑后用吸水紙在酶標板表面輕拭吸干。
(7)顯色劑盡量在臨用前配制，堅持不用過期顯色劑，肉眼可見淺藍色的TMB顯色劑不用。
(8)加樣時保持顯色劑不外流;A、B液應避免接觸金屬器械。加終止液時應避免產(chǎn)生氣泡。
(9)應保證C清潔，整個操作過程中保證酶標板不接觸次氯酸。以上的措施可以使“花板"降至zui低限度。從而提高檢測的特異性。并得到更準確、可靠的實驗結果。
