目前，檢測(cè)HIV抗體常用的初篩方法有金標(biāo)層析法和ELISA法。由于ELISA法實(shí)驗(yàn)時(shí)間較長(zhǎng)，對(duì)設(shè)備、工作環(huán)境、實(shí)驗(yàn)人員操作要求相對(duì)較高，因此中、小型以及偏遠(yuǎn)地區(qū)的實(shí)驗(yàn)室難以全面開(kāi)展，而金標(biāo)層析法具有操作簡(jiǎn)單、快速等優(yōu)點(diǎn)已被很多醫(yī)療單位用來(lái)進(jìn)行HIV抗體初篩。但在試劑的檢測(cè)診治當(dāng)中，由于HIV抗體初篩結(jié)果與確認(rèn)結(jié)果不符而引發(fā)的醫(yī)療糾紛時(shí)有發(fā)生，因此根據(jù)不同的醫(yī)療環(huán)境和單位選擇合適的檢測(cè)方法十分重要。本文對(duì)用兩種方法檢測(cè)HIV抗體初篩陽(yáng)性的結(jié)果與確認(rèn)結(jié)果進(jìn)行分析比較，旨在探討金標(biāo)層析法與ELISA法檢測(cè)HIV抗體在實(shí)際工作中的適用性，為合理選擇實(shí)驗(yàn)方法提供理論基礎(chǔ)。
1 ELISA試劑盒資料與方法
1.1 一般資料
所有血液樣本均來(lái)自醫(yī)院2005年門診和住院病人，共1208例，其中男648例，女560例，年齡0.5～90歲，平均39歲。用ELISA法和金標(biāo)層析法同時(shí)檢測(cè)其HIV抗體，所有樣本均在采樣后4h內(nèi)檢測(cè)完畢。
1.2 方法
1.2.1 金標(biāo)層析法 采用雙抗原夾心法原理，10～30min內(nèi)觀察結(jié)果。
1.2.2 ELISA法 利用雙抗原夾心法，操作步驟嚴(yán)格按ELISA試劑盒說(shuō)明書進(jìn)行。
1.3 試劑
兩種方法均使用上海伊麗薩生物科技有限公司生產(chǎn)的試劑，該試劑經(jīng)國(guó)家藥檢所批，批檢合格，且都在有效期內(nèi)（ELISA法試劑批號(hào)分別為：2005036601、2005056602、2004126608，金標(biāo)層析法試劑批號(hào)分別為：2005040304、2005052501、2005011905）。
1.4 儀器 洗板機(jī)Anth.s Fludo；酶標(biāo)儀Anth.s 2010。
1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析 檢測(cè)結(jié)果采用χ2檢驗(yàn)進(jìn)行數(shù)據(jù)處理，以P<0.05為差異有顯著性。
2 結(jié)果
對(duì)兩種方法檢測(cè)結(jié)果進(jìn)行分析比較， ELISA法與金標(biāo)層析法檢測(cè)HIV抗體的結(jié)果經(jīng)統(tǒng)計(jì)顯示差異無(wú)顯著性（χ2=0.65；P>0.05）
3 ELISA試劑盒討論
自1985年我國(guó)報(bào)道*例艾滋病以來(lái)［1］，艾滋病在我國(guó)的流行趨勢(shì)日趨嚴(yán)峻，近幾年更是進(jìn)入一個(gè)快速增長(zhǎng)期［2］。到目前為止，艾滋病尚無(wú)有效的治療措施，因此，對(duì)可疑人群的檢測(cè)和篩查顯得尤為重要。
近年，艾滋病的檢測(cè)手段被不斷更新和利用。自20世紀(jì)70年代，F(xiàn)anlk等建立了ELISA技術(shù)后［3］，該技術(shù)便廣泛用于臨床免疫檢測(cè)。用于檢測(cè)艾滋病的ELISA法第三代試劑，采取雙抗原夾心法原理，利用酶催化底物反應(yīng)的放大作用［3］，用來(lái)提高特異性抗原抗體反應(yīng)的敏感性。其特點(diǎn)為特異性和靈敏度高、準(zhǔn)確性好。而金標(biāo)層析法是繼ELISA法之后發(fā)展起來(lái)的一種膜固相免疫測(cè)定，其以膠體金作為標(biāo)記物，利用層析作用來(lái)檢測(cè)抗原或抗體［4］。用于檢測(cè)HIV抗體金標(biāo)層析法現(xiàn)在已廣泛使用于臨床和各醫(yī)療機(jī)構(gòu)。該方法操作簡(jiǎn)便、快速，無(wú)需特殊設(shè)備，通過(guò)實(shí)驗(yàn)檢測(cè)結(jié)果發(fā)現(xiàn)，兩種方法均有較高的靈敏度，金標(biāo)法陽(yáng)性的11例標(biāo)本用ELISA法檢測(cè)有4份標(biāo)本陰性、7份標(biāo)本陽(yáng)性，但兩者差異無(wú)顯著性（P>0.05），均可適用于醫(yī)學(xué)檢測(cè)。然而在實(shí)際的臨床試驗(yàn)中，選用HIV抗體初篩試劑時(shí)，應(yīng)視不同情況而定。如本實(shí)驗(yàn)的檢測(cè)結(jié)果中，11例金標(biāo)法初篩陽(yáng)性的樣本，經(jīng)省CDC確認(rèn)7例為陽(yáng)性，7例ELISA法檢測(cè)陽(yáng)性的樣本經(jīng)省CDC確認(rèn)均為陽(yáng)性?？梢?jiàn)，ELISA法的特異性高于金標(biāo)層析法，有較高的陽(yáng)性預(yù)期值。而金標(biāo)層析法存在較高的假陽(yáng)性率，其產(chǎn)生的原因多數(shù)還不清楚，排除技術(shù)因素外，可能主要是因?yàn)榻饦?biāo)法受實(shí)驗(yàn)條件和時(shí)間的限制，與ELISA試劑在制作技術(shù)上還存在一定的差異，還有一些針對(duì)HLA抗原的抗體、患者自身免疫性疾病、寄生蟲、其他病毒以及高丙種球蛋白癥病人的血清標(biāo)本也常容易出現(xiàn)假陽(yáng)性反應(yīng)［1］。
在醫(yī)院就診的過(guò)程中，因HIV-Ab初篩陽(yáng)性而確認(rèn)實(shí)驗(yàn)陰性導(dǎo)致的醫(yī)療糾紛時(shí)有發(fā)生。因患者不理解或醫(yī)患之間溝通不夠，勢(shì)必給醫(yī)院的醫(yī)療服務(wù)質(zhì)量和醫(yī)療形象造成負(fù)面影響，也給受檢者造成巨大的精神壓力和恐慌心理。因此選用一種特異性高、有較高的陽(yáng)性預(yù)期感、能zui大限度保證發(fā)現(xiàn)真正HIV感染者的試劑尤為重要，ELISA試劑即具有以上優(yōu)點(diǎn)。所以大、中型醫(yī)院在進(jìn)行HIV-Ab初篩時(shí)，除急需手術(shù)或輸血的病人用金標(biāo)層析法外，其余標(biāo)本應(yīng)盡量采用ELISA法，以降低假陽(yáng)性率，減少醫(yī)患糾紛，其他如進(jìn)行艾滋病流行病學(xué)監(jiān)測(cè)［1］，對(duì)特定人群HIV感染狀況和發(fā)展趨勢(shì)進(jìn)行無(wú)關(guān)聯(lián)和匿名調(diào)查與檢測(cè)；對(duì)流行病學(xué)、臨床、病毒學(xué)或HIV相關(guān)的研究對(duì)象進(jìn)行自愿檢測(cè)時(shí)也應(yīng)該選擇特異性高的ELISA試劑。金標(biāo)試劑可能由于本身反應(yīng)條件的限制，其質(zhì)量還有待進(jìn)一步提高，但該方法簡(jiǎn)便、快速、檢測(cè)敏感度高、假陰性率低，可適合街頭獻(xiàn)血員篩選的大批量檢測(cè)，經(jīng)濟(jì)合算，獻(xiàn)血者也樂(lè)意接受，可使無(wú)償獻(xiàn)血的血液合格率得到明顯提升，對(duì)提高血液質(zhì)量、保障輸血安全、減少血液浪費(fèi)、進(jìn)一步推廣無(wú)償獻(xiàn)血工作起到了積極作用。金標(biāo)試劑還具有易于保存（環(huán)境溫度為2～30℃）、儲(chǔ)存時(shí)間長(zhǎng)（2年）、不浪費(fèi)等諸多優(yōu)點(diǎn)，對(duì)HIV-Ab檢測(cè)標(biāo)本zui少、不具備ELISA測(cè)定條件的偏遠(yuǎn)地區(qū)中、小型檢驗(yàn)科也尤為適用。
【參考文獻(xiàn)】
1 陳曦，陳炎.艾滋病防治技術(shù)手冊(cè).長(zhǎng)沙：湖南科學(xué)技術(shù)出版社，2005，14-15；151-152.
2 強(qiáng)來(lái)英，林旭東，裴麗健，等.人類免疫缺陷病毒感染抗體檢測(cè)窗口期血清檢出.中國(guó)輸血雜志，2001，14（6）：341.
3 王蘭蘭.臨床免疫和免疫學(xué)檢驗(yàn)，第3版.北京：人民衛(wèi)生出版社，2005，91-95.
4 葉應(yīng)嫵，王毓三.中華醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)全書，第2版.南京：東南大學(xué)出版社，1997，379-382.
【閱讀延伸】
ELISA法檢測(cè)HIV操作要點(diǎn)
HIV抗體檢測(cè)是發(fā)現(xiàn)HIV感染的有效途徑，ELISA法是艾滋病初篩試驗(yàn)室檢測(cè)HIV抗體普遍使用的方法之一。具體操作過(guò)程中ELISA法的影響因素較多，稍有不慎就會(huì)降低實(shí)驗(yàn)的準(zhǔn)確性。避免諸多影響因素、保證結(jié)果準(zhǔn)確性，才能夠充分發(fā)揮ELISA法的優(yōu)點(diǎn)，經(jīng)過(guò)多次實(shí)驗(yàn)的總結(jié)和分析，這篇文章分享了ELISA試劑盒相關(guān)的經(jīng)驗(yàn)
ELISA檢測(cè)HIV的實(shí)驗(yàn)室內(nèi)質(zhì)量控制
室內(nèi)質(zhì)控是實(shí)驗(yàn)室內(nèi)部對(duì)所有影響檢測(cè)質(zhì)量的各個(gè)環(huán)節(jié)進(jìn)行系統(tǒng)控制，目的是控制本實(shí)驗(yàn)室常規(guī)工作的精密度，提高常規(guī)工作前后的一致性。在ELISA法檢測(cè)HIV試驗(yàn)中，當(dāng)質(zhì)控血清的S/CO值波動(dòng)在 +2S范圍內(nèi)，表明工作正常，結(jié)果可靠，若超過(guò) +2S范圍時(shí)，系統(tǒng)處于告警狀態(tài)，應(yīng)予注意，及時(shí)分析原始數(shù)據(jù)，對(duì)具體檢驗(yàn)過(guò)程進(jìn)行回顧性分析，查找原因后給予糾正并重復(fù)測(cè)試，若超過(guò)
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