人甲硫-腦啡肽ELISA 檢測(cè)試劑盒
試驗(yàn)原理：
Met-Enk試劑盒是固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)（ELISA）.已知Met-Enk濃度的標(biāo)準(zhǔn)品、未知濃度的樣品加入微孔酶標(biāo)板內(nèi)進(jìn)行檢測(cè)。先將Met-Enk和*標(biāo)記的抗體同時(shí)溫育。洗滌后，加入親和素標(biāo)記過(guò)的HRP。再經(jīng)過(guò)溫育和洗滌，去除未結(jié)合的酶結(jié)合物，然后加入底物A、B，和酶結(jié)合物同時(shí)作用。產(chǎn)生顏色。顏色的深淺和樣品中Met-Enk的濃度呈比例關(guān)系。
自備材料
蒸餾水。
加樣器：5ul、10ul、50ul、100ul、200、500ul、1000ul。
振蕩器及磁力攪拌器等。
安全性
避免直接接觸終止液和底物A、B。一旦接觸到這些液體，請(qǐng)盡快用水沖洗。
實(shí)驗(yàn)中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。
不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。
操作注意事項(xiàng)
試劑應(yīng)按標(biāo)簽說(shuō)明書(shū)儲(chǔ)存，使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過(guò)后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄，不可保存。
實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中，密封保存，以免變質(zhì)。
不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號(hào)的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。
使用一次性的吸頭以免交叉污染，吸取終止液和底物A、B液時(shí)，避免使用帶金屬部分的加樣器。
使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。
洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干，不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
底物A應(yīng)揮發(fā)，避免長(zhǎng)時(shí)間打開(kāi)蓋子。底物B對(duì)光敏感，避免長(zhǎng)時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸，有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。
加入試劑的順序應(yīng)一致，以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣。
按照說(shuō)明書(shū)中標(biāo)明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。
人甲硫-腦啡肽ELISA 檢測(cè)試劑盒樣品收集、處理及保存方法
血清-----操作過(guò)程中避免任何細(xì)胞刺激。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管。收集血液后，1000×g離心10分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。
血漿-----EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測(cè)。1000×g離心30分鐘去除顆粒。
細(xì)胞上清液---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。
組織勻漿-----將組織加入適量生理鹽水搗碎。1000×g離心10分鐘，取上清液
保存------如果樣品不立即使用，應(yīng)將其分成小部分-70 ℃保存，避免反復(fù)冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒，檢測(cè)前先離心或過(guò)濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
試劑的準(zhǔn)備
標(biāo)準(zhǔn)品：標(biāo)準(zhǔn)品的系列稀釋?xiě)?yīng)在實(shí)驗(yàn)時(shí)準(zhǔn)備，不能儲(chǔ)存。稀釋前將標(biāo)準(zhǔn)品振蕩混勻
洗滌緩沖液（50×）的稀釋?zhuān)赫麴s水50倍稀釋。
人甲硫-腦啡肽ELISA 檢測(cè)試劑盒
操作步驟
使用前，將所有試劑充分混勻。不要使液體產(chǎn)生大量的泡沫，以免加樣時(shí)加入大量的氣泡，產(chǎn)生加樣上的誤差。
根據(jù)待測(cè)樣品數(shù)量加上標(biāo)準(zhǔn)品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)。每個(gè)標(biāo)準(zhǔn)品和空白孔建議做復(fù)孔。每個(gè)樣品根據(jù)自己的數(shù)量來(lái)定，能使用復(fù)孔的盡量做復(fù)孔。標(biāo)本用標(biāo)本稀釋液1：1稀釋后加入50ul于反應(yīng)孔內(nèi)。
加入稀釋好后的標(biāo)準(zhǔn)品50ul于反應(yīng)孔、加入待測(cè)樣品50ul于反應(yīng)孔內(nèi)。立即加入50ul的*標(biāo)記的抗體。蓋上膜板，輕輕振蕩混勻，37℃溫育1小時(shí)。
DAH010-1ml Goat anti-rat IgG/HRP 辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記羊抗大鼠IgG 1ml
DAH011-0.1ml Goat anti-Guinea IgG/HRP 辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記羊抗豚鼠IgG 0.1ml
DA2968-0.1ml TIMP-2（Tissue Inhibitor of Metalloproteinase-2） 金屬蛋白酶組織抑制因子-2抗體 0.1ml
DA2968-0.2ml TIMP-2（Tissue Inhibitor of Metalloproteinase-2） 金屬蛋白酶組織抑制因子-2抗體 0.2ml
DA2969-0.1ml TIMP-3（Tissue Inhibitor of Metalloproteinase-3） 金屬蛋白酶組織抑制因子-3抗體 0.1ml
DA2969-0.2ml TIMP-3（Tissue Inhibitor of Metalloproteinase-3） 金屬蛋白酶組織抑制因子-3抗體 0.2ml
DA2970-0.1ml TIMP-4（Tissue Inhibitor of Metalloproteinase-4） 金屬蛋白酶組織抑制因子-4抗體 0.1ml
人甲硫-腦啡肽ELISA 檢測(cè)試劑盒
DAH012-1ml Goat anti-Rabbit IgG/HRP 辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記羊抗兔IgG 1ml
DAH013-1ml Goat anti-Bovine IgG/HRP 辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記羊抗牛IgG 1ml
DAH014-0.1ml Goat anti-Chicken IgG/HRP 辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記羊抗雞IgG 0.1ml
DAH014-1ml Goat anti-Chicken IgG/HRP 辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記羊抗雞IgG 1ml
DA2970-0.2ml TIMP-4（Tissue Inhibitor of Metalloproteinase-4） 金屬蛋白酶組織抑制因子-4抗體 0.2ml
DA2971-0.2ml TLR1/GD2/CD281（Toll-like receptor 1） Toll樣受體1抗體 0.2ml
DA2972-0.2ml TLR2/CD282 （Toll-like receptor 2） Toll樣受體2抗體 0.2ml
DA2973-0.2ml TLR3 （Toll-like receptor 3） Toll樣受體3抗體 0.2ml
DA2974-0.1ml TLR4/CD284 （Toll-like receptor 4） Toll樣受體4抗體 0.1ml
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