原代細胞培育也叫初代培育，是樹立細胞系的第一步,今日小編給咱們帶來原代細胞培育的一些技巧，希望咱們能有所收獲！
1、原代細胞與細胞系有什么區(qū)別？
根據(jù)傳統(tǒng)界說，自組織第一次收獲和接種的細胞被稱為原代細胞 [Freshney, R.I. (1987). Culture of Animal Cells. A Manual of Basic Technique. (New York, Alan R. Liss, Inc.)]. 這類細胞直接從組織別離，生命周期有限，經(jīng)數(shù)次傳代后會逐步中止成長。原代細胞在有限的生命周期內(nèi)需把握好細胞的大成長空間，以保持細胞群中基因型和表型的一致性。
細胞系是不斷成長、分解的細胞群，因其經(jīng)過遺傳改造，致使其具有無限增長的潛能。體外成長的細胞系用于醫(yī)療或科研。
但實際上，經(jīng)過長時間、連續(xù)的傳代培育后，細胞系隨著代數(shù)的增加，細胞的基因型和表型都有可能發(fā)生改動。
需求指出的是，在不同的科研小組中這些術(shù)語的界說會有所不同。許多研究員不必細胞系這個詞表明細胞群，除非細胞經(jīng)過了遺傳改造。
2、倍增和代數(shù)有什么區(qū)別？
倍增是培育物中細胞總數(shù)的翻倍，通常是指細胞指數(shù)或?qū)?shù)成長期。代數(shù)是指細胞群從培育瓶中移出，傳代培育進程的次數(shù)，傳代培育的意圖，是使細胞處于低密度以刺激其進一步成長。
3、接收到的凍存細胞該怎么處理？
收到包裝箱后，立即將凍存細胞從干冰移入液氮中凍存。此進程盡量快，以避免升溫。不要將細胞儲存在-80℃，這樣會對細胞造成不可挽回的傷害。
4、凍存的細胞該怎么開端培育？
(1) 將一管細胞從液氮罐中取出，留意保護手和眼睛。
(2) 將凍存管快速的放入37℃水浴中，輕輕抓住并旋轉(zhuǎn)，直到管內(nèi)物體*融化。
(3) 將凍存管立即從水浴中拿出，擦干，轉(zhuǎn)入無菌環(huán)境。
(4) 用70％的酒精沖刷凍存管，然后擦去剩余酒精。
(5) 翻開蓋子，留意手指不要碰到里邊的螺紋（留意，因為凍存管有負壓，開蓋時可能會有少數(shù)溢出，這是正?，F(xiàn)象）。
(6) 用多聚賴氨酸（或參照說明書）包被培育瓶。大都細胞引薦的接種密度為每平方厘米5000個細胞。
(7) 蓋好培育瓶的蓋子，輕輕搖晃培育瓶以使細胞散布均勻。若需求氣體交換可翻開蓋子。
(8) 將培育瓶放入培育箱中（37℃，5%CO2，95%空氣）
(9) 放入培育箱后第6-16小時替換一次培育基，以去除殘留的二甲基亞楓和未貼壁的細胞。
5、細胞培育進程中，多久替換一次培育基？
這取決于細胞成長的速度。一般來說2-3天替換一次培育基，許多細胞培育實驗室通常在周一，周三，周五替換培育基。
留意：凍存細胞復(fù)蘇后，在6-16小時內(nèi)替換培育基，以去除殘留的二甲基亞楓和死亡的細胞。
6、我能擴增培育和再次凍存原代正常人類細胞嗎？
這取決于細胞的類型。一些細胞類型像神經(jīng)細胞，神經(jīng)膠質(zhì)細胞和一些成長緩慢的上皮細胞，不引薦擴增培育和再次凍存。其它的細胞類型像成纖維細胞、星形細胞、腎系膜細胞、星形膠質(zhì)細胞等等，可以擴增培育和再次凍存。
但是，需求留意的是再次凍存的進程可能導(dǎo)致細胞成長性能的改動。
7、培育瓶中應(yīng)該加入多少體積的培育基？
咱們引薦的用量為：T-25培育瓶5ml，T-75培育瓶15ml，T-150培育瓶30ml。
