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微生物的糖類發(fā)酵試驗(yàn)闡明

閱讀:307發(fā)布時(shí)間:2020-6-30

糖發(fā)酵試驗(yàn)是常用的辨別微生物的生化反響,在腸道細(xì)菌的判定上尤為重要。絕大多數(shù)細(xì)菌都能運(yùn)用糖類作為碳源和動(dòng)力,但是它們?cè)诜只穷愇镔|(zhì)的才干上有很大的差異。有些細(xì)菌能分化某種糖發(fā)生有機(jī)酸(如乳酸、醋酸、丙酸等)和氣體(如氫氣、甲烷、二氧化碳等);有些細(xì)菌只產(chǎn)酸不產(chǎn)氣。

不同的細(xì)菌可根據(jù)分化運(yùn)用糖才干的差異表現(xiàn)出是否產(chǎn)酸產(chǎn)氣作為判定菌種的根據(jù)。例如大腸桿菌能分化乳糖和葡萄糖產(chǎn)酸并產(chǎn)氣;傷寒桿菌分化葡萄糖產(chǎn)酸不產(chǎn)氣,不能分化乳糖;一般變形桿菌分化葡萄糖產(chǎn)酸產(chǎn)氣,不能分化乳糖。發(fā)酵培育基含有蛋白胨,指示劑(溴甲酚紫),倒置的德漢氏小管和不同的糖類。當(dāng)發(fā)酵產(chǎn)酸時(shí),溴甲酚紫指示劑可由紫色(pH6.8)變?yōu)辄S色(pH5.2)。氣體的發(fā)生可由倒置的德漢氏小管中有無氣泡來證明。

糖發(fā)酵試驗(yàn)一般選用試管、德漢氏小管、試管架及各種糖類試劑等多種試劑和耗材,操作繁瑣,耗時(shí)較長(zhǎng)。怎么能夠簡(jiǎn)潔試驗(yàn)流程,節(jié)省時(shí)間呢?近年來,HiMedia公司的出產(chǎn)的糖發(fā)酵試劑盒在國(guó)ji上悄然盛行。

該試劑盒含35項(xiàng)糖發(fā)酵檢查,其間A盒和B盒各含12項(xiàng)糖發(fā)酵試驗(yàn),C盒含11項(xiàng)糖發(fā)酵試驗(yàn)和1個(gè)對(duì)照試驗(yàn),經(jīng)過微生物發(fā)酵反響,培育基顏色發(fā)生改變。

A盒:乳糖、木糖、麥芽糖、果糖、葡萄糖、半乳糖、棉子糖、海藻糖、蜜二糖、蔗糖、L-阿拉伯糖、甘露糖

B盒:菊粉、葡糖酸鈉、甘油、水楊苷、己六醇、肌醇、*、*、核糖醇、阿糖醇、赤藻糖醇、-甲基-D-葡萄糖苷

C盒:鼠李糖、纖維二糖、松三糖、α-甲基-D-甘露糖苷、*、鄰硝基酚-β半乳糖苷(ONPG)、七葉苷、D-阿拉伯糖、檸檬酸鹽、丙二酸、山梨糖、對(duì)照

待判定菌種應(yīng)先jin行分離和純化??稍贖iMedia營(yíng)養(yǎng)瓊脂或腦心浸膏瓊脂上挑取一個(gè)菌落,接種在5ml腦心浸膏肉湯中,在35-37℃培育4-6小時(shí),直到在620nm處,接種液濁度≥0.5OD。一些苛養(yǎng)菌或許需求孵育跨越6小時(shí),以保證接種液濁度抵達(dá)0.5OD。

無菌翻開試劑盒,撕掉封條。每孔接種50μl上述菌液。也可用接種環(huán)劃線。在35±2℃孵育18-24小時(shí)即可,顯色作用與《作用詮釋表》、《菌種標(biāo)準(zhǔn)表》比對(duì)后,從而對(duì)菌種作出判定,幾乎包含一切的糖類發(fā)酵試驗(yàn),一次性即可出試驗(yàn)作用,便當(dāng)快


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