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技術(shù)文章

ELISA試劑盒使用的關(guān)鍵要點(diǎn)

閱讀:90發(fā)布時間:2020-2-17

ELISA試劑盒的運(yùn)用關(guān)鍵:
1、依照闡明書中標(biāo)明的時刻、加液的量及次序進(jìn)行溫育操作。
2、運(yùn)用潔凈的塑料容器裝備洗滌液。運(yùn)用前充沛混勻試劑盒里的各種成份及樣品。
3、試劑應(yīng)按標(biāo)簽闡明書貯存,運(yùn)用前康復(fù)到室溫。稀稀往后的規(guī)范品應(yīng)丟掉,不可保存。
4、標(biāo)本因?yàn)槔洳貢rIg G聚組成多聚體,F(xiàn)ib非特異性吸附,重復(fù)凍融機(jī)械切力致使蛋白分子受損。
5、試驗(yàn)中不必的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,防止蛻變。
6、運(yùn)用一次性的吸頭防止穿插污染,吸取停止液和底物A、B液時,防止運(yùn)用帶金屬部分的加樣器。
7、加樣時禁絕,槍頭吸樣時插入樣本液面下2mm為宜。
8、不必的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前運(yùn)用。
9、參加試劑的次序應(yīng)共同,以確保一切反響板孔溫育的時刻相同。
10、應(yīng)該注意試劑4°c冷藏時水化層構(gòu)成,蛋白分子分布反常。
11、底物A應(yīng)揮發(fā),防止長時刻翻開蓋子。ELISA試劑盒底物B對光靈敏,防止長時刻露出于光下。防止用手觸摸,有毒。試驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。
12、常選用的溫度有43、37°c、室溫、或許4°c等。37°c較常用,4°c作用較好,但孵育時刻有異。
13、要注意內(nèi)源如風(fēng)濕因子,補(bǔ)體,高濃度非特異性免疫球蛋白,異嗜性抗體及某些自身抗體等;外源如標(biāo)本溶血,細(xì)菌污染,貯存時刻過長及凝結(jié)等要素影響。
14、洗滌酶標(biāo)板時應(yīng)充沛拍干,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反響孔中吸水。
15、在運(yùn)用ELISA試劑盒時應(yīng)注意:2-8℃保存(特殊情況在外)、同一種類不同批號試劑不能混用、不同種類試劑盒顯色劑不能混用。


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