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豬組織因子（TF）ELISA試劑盒樣本處理及要求

閱讀：199發(fā)布時(shí)間：2020-2-6

豬組織因子（TF）ELISA試劑盒樣本處理及要求:

1.血清：室溫血液天然凝固10-20分鐘，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。
細(xì)心搜集上清，保存過(guò)程中如呈現(xiàn)沉積，應(yīng)再次離心。

2. 血漿：應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。細(xì)心搜集上清，保存過(guò)程中如有沉積構(gòu)成，應(yīng)該再次離心。

3. 尿液：用無(wú)菌管搜集，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。細(xì)心搜集上清，保存過(guò)程中如有沉積構(gòu)成，應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照實(shí)行。

4. 細(xì)胞培養(yǎng)上清：檢測(cè)分泌性的成份時(shí)，用無(wú)菌管搜集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。細(xì)心搜集上清。檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí)，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細(xì)胞懸液，細(xì)胞濃度達(dá)到100萬(wàn)/ml左右。經(jīng)過(guò)重復(fù)凍融，以使細(xì)胞損壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。細(xì)心搜集上清。保存過(guò)程中如有沉積構(gòu)成，應(yīng)再次離心。

5. 組織標(biāo)本：切開(kāi)標(biāo)本后，稱(chēng)取分量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。?biāo)本融化后依然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS（PH7.4），用手藝或勻漿器將標(biāo)本勻漿充分。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。細(xì)心搜集上清。分裝后一份待檢測(cè)，其余冷凍備用。

6. 標(biāo)本收集后盡早進(jìn)行提取，提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行，提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，可將標(biāo)本放于-20℃保存，但應(yīng)防止重復(fù)凍融.

7. 不能檢測(cè)含NaN3的樣品，因NaN3按捺辣根過(guò)氧化物酶的（HRP）活性。


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