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技術(shù)文章

怎樣避免在培育中胎牛血清黑點生成

閱讀：166發(fā)布時間：2019-12-26

（1） 盡可能地減少血清凍融次數(shù)。

（2） 培育基無需37℃水浴。

（3） 培育基保持zuiPH 值7.0-7.2。

（4） 嚴(yán)格控制制造培育基的水質(zhì)，容器定期刷洗。

（5） 掌握細(xì)胞傳代的zui機遇，細(xì)胞切勿生長過老。

一、化凍   
將血清從-20 度冰箱中取出，室溫（或浸于自來水中）化凍（約需求30分鐘至2小時，也可放于4度冰箱化凍過夜；化凍后若不馬上滅活，可以放入4度冰箱中暫時保存）

二、滅活   
（1）放入室溫的水浴鍋內(nèi)開端加熱（一起放入一個空的血清瓶，內(nèi)裝100ml自來水，插入一根溫度計，溫度監(jiān)控以此為準(zhǔn)）

（2）當(dāng)溫度計顯示56度時，停止加熱，改為連續(xù)加熱，保持56度（±0.5度）30分鐘（±3分鐘；若不小心使溫度上升超過56度，則：若仍未超過60度，且時間很短，比如不超過5分鐘，則仍可運用；若超過60度，或許時間較長，則棄去不用，或許測驗用于一些一般細(xì)胞的培育）

（3）取出，天然冷卻至室溫（約需1-3小時），可分裝或-20度繼續(xù)凍存。

三、分裝   
（1）轉(zhuǎn)入無菌間，在超凈臺內(nèi)將血清分裝入10ml離心管中（留意預(yù)先要將血清輕輕搖動數(shù)周、混勻；用吸液管或吹大管吹出血清時要留意：不要吹出氣泡（血清很粘稠，很簡單產(chǎn)生氣泡；假如產(chǎn)生氣泡， 則在酒精燈火焰上過一下）。

（2）放入-20 度冰箱凍存。

（3）全部操作約需求4-6小時。


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