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技術(shù)文章

豐壽講述:細(xì)胞因子的要求及原理

閱讀：99發(fā)布時(shí)間：2019-12-6

重組細(xì)胞因子要求： 

1. 真實(shí)性：重組蛋白產(chǎn)品一致經(jīng)過N末端氨基酸序列分析；必要時(shí)應(yīng)用SDS-PAGE, RP-HPLC和質(zhì)譜(MS)檢測(cè)其真實(shí)性。 

2. 純度：應(yīng)用SDS-PAGE和RP-HPLC方法分析產(chǎn)品純度。 

3. 生物活性：進(jìn)行相應(yīng)的體外(in vitro)或體內(nèi)(in vivo)活性檢測(cè)。 

4. 蛋白含量：通過紫外光譜分析，SDS-PAGE電泳檢測(cè)；必要時(shí)應(yīng)用HPLC定量標(biāo)準(zhǔn)蛋白溶液。 

5. 微生物：重組蛋白在裝瓶之前都經(jīng)過濾除菌處理。 


重組細(xì)胞因子的狀態(tài)： 

市場(chǎng)上主流的重組蛋白產(chǎn)品，多在不含載體蛋白或其他添加物的條件下，以低鹽的形式做凍干處理，因此微量(多以微克計(jì)量)的細(xì)胞因子在凍干過程中會(huì)沉積于管內(nèi)，形成很薄或不可見的蛋白層，所以建議在收到試劑后，務(wù)必于開蓋前先離心20-30秒，使可能附于管蓋或管壁的蛋白成分聚集于凍干館的底部(此時(shí)能否見到白色沉淀均屬正?，F(xiàn)象)。


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