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技術(shù)文章

豐壽探討:ELISA試驗常用規(guī)則和通用過程

閱讀:179發(fā)布時間:2019-11-22

ELISA試驗常用的規(guī)則:
 
ELISA是繼免疫熒光和放射免疫技術(shù)之后發(fā)展起來的一種免疫酶技術(shù)。它是以免疫學(xué)反應(yīng)為根底,將抗原、抗體的特異性反應(yīng)與酶對底物的催化作用相結(jié)合起來的一種敏感性很高的試驗技術(shù)。以下是對ELISA試驗的通用過程的簡單說明。 
 
ELISA試驗通用過程:
 
(1)、要保證移液槍的性,誤差不能超過2%??捎盟碗娮犹炱竭M行判定。如果有專業(yè)人員進行糾正更好。

(2)、要配備20ul、50ul、100ul、1000ul和排槍各一支。提取不相同的液體后,要更換槍頭。即使是提取標(biāo)準(zhǔn)品時也相同。要在試驗前1小時將試劑盒從冰箱中取出,使各種試劑都恢復(fù)到室溫,以使作用更安穩(wěn)。 

(3)、試驗時,要使底物避光貯存。

(4)、用槍提取液體時速度不能太快,防止生成氣泡而使提取量不。

(5)、提取液體時,要用量程和需要量附近的槍去吸,減小誤差數(shù)值。

(6)、將液體加到酶標(biāo)孔中時,防止槍頭和孔內(nèi)液體觸摸,可使槍頭上的液滴和孔壁觸摸,液滴會天然流下去。

(7)、液體全部加完后,可將酶標(biāo)板在桌子上平行悄悄搖晃30秒,是液體緩和均勻。也可以用酶標(biāo)儀的晃動功用。

(8)、溫浴時,要用不干膠或膠帶紙封好酶標(biāo)板,防止水分的蒸騰。

(9)、洗板時,每次洗液參加后,應(yīng)靜置1分鐘,使清洗更加*。沒有洗板機時,倒去液體后,要將酶標(biāo)板在報紙或毛紙上用力拍干。

(10)、洗液不夠時,可用蒸餾水自行制造PH7.4,0.02M的磷酸緩沖液,參加0.1%的吐溫20作為洗液。參加1/1000的疊氮鈉后可長期保存。

(11)、底物是光敏感的,需要在臨用前現(xiàn)配。

(12)、檢測前,要翻開酶標(biāo)儀,使之安穩(wěn)10分鐘以上。

(13)、底物有一定的du性,間斷液對皮膚有腐蝕性,應(yīng)盡量防止觸摸。

(14)、待檢樣品要澄清,否則會影響作用的性。

(15)、溫浴時刻應(yīng)遵從試劑盒規(guī)定。

(16)、應(yīng)盡量做雙孔試驗,這樣才調(diào)保證數(shù)據(jù)的性。

(17)、對作用有疑問的樣品要用其它方法進行確證。


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