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技術(shù)文章

細胞培養(yǎng)中呈現(xiàn)黑點是污染嗎?如何處理?

閱讀:120發(fā)布時間:2019-10-18

一旦您在細胞培養(yǎng)的過程中發(fā)現(xiàn)有黑點生成,首先,要肉眼調(diào)查培養(yǎng)基是否混濁,然后,在鏡下調(diào)查培養(yǎng)細胞成長的狀態(tài),黑點是否游動。假如細胞被污染,微生物則會大量繁殖,培養(yǎng)基就會敏捷變黃、變混濁。污染包含細菌污染、支原體污染等。

假如在鏡下調(diào)查細胞,成長狀態(tài)杰出,與黑點呈現(xiàn)前比較,沒有任何改變,那么,黑點的呈現(xiàn)可能與以下幾種狀況有關(guān):

1)細胞成長過老,破碎的細胞殘骸;

2)血清質(zhì)量不好,重復凍融的成果;

3)制造培養(yǎng)基的pH值偏高,不宜細胞成長;

4)制造培養(yǎng)基的水質(zhì)、容器不合格。可應用離心、過濾的方法去除這些黑點;

5)培養(yǎng)原代細胞中呈現(xiàn)小黑點,可能是原代組織中的雜質(zhì),多次傳代能夠消除。

細胞培養(yǎng)中如何避免黑點生成?

1)盡可能地削減血清凍融次數(shù)。

2)培養(yǎng)基無需37℃水浴。

3)培養(yǎng)基保持佳PH值7.0-7.2。


4)嚴格控制制造培養(yǎng)基的水質(zhì),容器定時刷洗。
 


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