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ELISA試劑盒在實(shí)驗(yàn)遇到的一些問題和解決辦法

閱讀：160發(fā)布時(shí)間：2019-10-11

ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)以靈敏度較高、特異性較好的特點(diǎn)在實(shí)驗(yàn)上得到了廣泛的應(yīng)用，但操作中的各個(gè)環(huán)節(jié)對(duì)實(shí)驗(yàn)的檢測(cè)作用影響較大，如不留意，有或許導(dǎo)致顯色不全、花板等結(jié)果。下面我們談?wù)劜僮髦懈鱾€(gè)環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問題的原因及解決辦法。

一  挑選ELISA試劑盒：

挑選質(zhì)量的檢測(cè)試劑，嚴(yán)格依照試劑闡明書進(jìn)行操作，操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。

二  加樣或許原因：

1）血清或血漿標(biāo)本分離欠好即進(jìn)行加樣；

2）手工操作中，加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時(shí)刻過長(特別是室內(nèi)溫度較高時(shí))；

3）加完標(biāo)本再加酶試劑時(shí)酶濺起孔外。

解決辦法：

1）標(biāo)本為血清：將血液先天然寄存1-2小時(shí)后，再用3000rmp離心15分鐘；標(biāo)本為血漿：有必要運(yùn)用含抗凝劑的血液標(biāo)本收集管，采血后有必要立即顛倒*混合5-10次，放置一段時(shí)刻后，3000rpm離心15分鐘；若在幾天內(nèi)檢測(cè)，可放在2-8℃冰箱中，若要儲(chǔ)存，則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。

2)加樣后及時(shí)放入孵箱。

3)假如選用AT或其他全自動(dòng)加樣，挑選FAME或其他后處理儀器加酶試劑。

4)標(biāo)本較多時(shí)，請(qǐng)分批操作。

三  孵育或許原因：

1)孵育時(shí)未貼封片或加蓋，使標(biāo)本或稀釋液蒸騰，吸附于孔壁，難于清洗*；

2)孵育時(shí)刻人為延長，導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反響孔周圍，難以清洗*。

解決辦法：

1)貼封片或加蓋；

2)按闡明步驟嚴(yán)格控制操作時(shí)刻。

 


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