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技術(shù)文章

關(guān)于血清,你必須知道的幾點!

閱讀:163發(fā)布時間:2019-9-26

一、保存血清的辦法是什么?

主張血清應(yīng)保存在-5℃至-2O℃。但是,若存放于4℃時,請勿超過一個月。若您一次無法用完一瓶,主張您無菌分裝血清至恰當(dāng)?shù)臏缇萜鲀?nèi),再放回冷凍。重復(fù)凍融會對血清的品質(zhì)形成不良影響。
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二、怎么凍結(jié)血清才不會使產(chǎn)品質(zhì)量受損?

主張您將血清從冷凍箱取出后,先置于2~8℃冰箱使之溶解,然后在室溫下使之全溶。但必須留意的是,溶解進(jìn)程中必須規(guī)矩地?fù)u晃均勻。

三、血清凍結(jié)后發(fā)現(xiàn)有絮狀沉積物呈現(xiàn),該怎么處理?

由于GIBCO血清在過濾之前,沒有通過預(yù)老化(pre-aged)處理,所以在凍結(jié)進(jìn)程(包含沒有*凍結(jié))或儲存在2-8℃時,血清中的各種蛋白和脂蛋白(如凝集素、纖維蛋白原和玻連蛋白等)或許會集合成團(tuán),形成絮狀沉積或外觀混濁;在運輸進(jìn)程中,ELISA試劑盒由于時間較長,所以往往有少許凍結(jié),因而也或許稍有沉積,但這些都不影響血清性能。

若您欲去除這些絮狀沉積物,能夠?qū)⒀宸盅b至無菌離心管內(nèi),以400g略微離心,上清液即可接著加入培育基內(nèi)一起過濾。咱們不主張您以過濾的辦法去除這些絮狀沉積物,由于它或許會阻塞過濾膜。

四、何謂熱滅活?

一般是以56℃,30分鐘來處理已凍結(jié)的血清,由于此加熱過程,能夠使補體去活化,而補體所參與的反應(yīng)有:溶細(xì)胞,平滑肌的收縮,肥大細(xì)胞和血小板組胺的開釋,增強(qiáng)吞噬作用,淋巴細(xì)胞、巨噬細(xì)胞的趨化和激活。

五、有必要做熱滅活嗎?

試驗顯現(xiàn),通過正確處理的熱滅活血清,對大多數(shù)的細(xì)胞而言是不需要的。經(jīng)此處理過的血清對細(xì)胞的成長只要細(xì)小的促進(jìn),或*沒有任何作用,甚至一般由于高溫處理影響了血清的質(zhì)量,而形成細(xì)胞成長速率的降低。而通過熱滅活的血清,沉積物的形成會明顯增多,這些沉積物在倒置顯微鏡下觀察,像是“小黑點”,常常會讓研究者誤以為是血清遭受污染,而把血清放在37℃環(huán)境中,又會使此沉積物更增多,使研究者誤認(rèn)為是微生物的割裂擴(kuò)增。

因而主張您,若非必須,您能夠不做熱滅活處理血清。這樣,不僅節(jié)省您名貴的時間,更保證血清的質(zhì)量。只在做免疫學(xué)研究或培育干細(xì)胞、昆蟲細(xì)胞平和滑肌細(xì)胞時,才推薦做熱滅活。

六、怎么削減沉積物的發(fā)生?

主張您在使用血清的時候,留意下列的操作:

凍結(jié)血清時,請按照所主張的逐步凍結(jié)法(-20℃至4℃ 至室溫),若血清凍結(jié)時改變的溫度太大(如-20℃至 37℃),試驗顯現(xiàn)十分容易發(fā)生沉積物。

凍結(jié)血清時,請隨時將之搖晃均勻,使溫度及成分均一,削減沉積的發(fā)生

請勿將血清置于37℃太久。若在37℃放置太久,血清會變得混濁,同時血清中許多較不穩(wěn)定的成分也會因而受到危害,而影響血清的質(zhì)量。

血清的熱滅活十分容易形成沉積物的增多,若非必要,則毋須做此過程。若必須做血清的熱滅活,請恪守56℃,30分鐘的原則,而且隨時搖晃均勻。溫度過高,時間過久或搖晃不均勻,都會形成沉積物的增多。

 


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