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閱讀:123發(fā)布時(shí)間:2019-9-10
污染是細(xì)胞培育的大敵。預(yù)防和避免污染是細(xì)胞培育成功的要害之一。一開始就要十分重視,避免污染,否則會(huì)前功盡棄,不僅浪費(fèi)時(shí)間,并且浪費(fèi)人力、物力,乃至形成無法彌補(bǔ)的丟失。 細(xì)胞培育中常見的生物污染類型有6種,分別是細(xì)菌污染、支原體污染、原蟲污染、黑膠蟲污染、真菌污染以及非細(xì)胞污染。他們?cè)诩?xì)胞培育中污染的特點(diǎn)如下:
1.支原體:黑色的,好象多為多形,培育液一般培育液一般會(huì)污濁,原體感染,國內(nèi)血清許多都沒有做支原體陰性檢測,而支原體是牛血清中常見的微生物之一。并且它不能用過濾的辦法除掉。支原體感染細(xì)胞以后,細(xì)胞病變不很顯著,只是漸漸死qu。
2. 真菌:一般培育液清亮,不變色,鏡下有絲狀物,有些真菌開始很像死細(xì)胞碎片,只是它許多許多的小塊很清楚,象珊瑚狀,不象細(xì)胞碎片分不清,漸漸的會(huì)長出很細(xì)的黑色絲狀物。真菌成長的比較慢,不象細(xì)菌那么簡單被發(fā)現(xiàn),但是一旦發(fā)現(xiàn)有它的存在細(xì)胞就被污染了,也很難救活了。
3. 黑膠蟲:能夠穿透濾膜,也能夠通過空氣傳播,低倍下為黑色點(diǎn)狀,高倍下可看見黑色的小蟲游來游去,培育液也是不渾的,一般不會(huì)太影響,細(xì)胞仍是能夠用的。常常是細(xì)胞成長狀態(tài)杰出,且觀測到的運(yùn)動(dòng)物無顯著增多,且培育液色彩、透明度無顯著變化,可在同一批號(hào)的血清養(yǎng)的細(xì)胞中發(fā)現(xiàn)類似現(xiàn)象。對(duì)細(xì)胞成長狀態(tài)不會(huì)有顯著影響,在細(xì)胞增殖旺盛之后會(huì)天然消失,除替換血清外無須特別處理。
4. 非同種細(xì)胞污染 :便是細(xì)胞交叉污染,因?yàn)榧?xì)胞培育操作時(shí)各細(xì)胞株所需的器件和溶液沒有嚴(yán)格分隔,往往會(huì)使一種細(xì)胞被另一種細(xì)胞污染。
5. 原蟲:培育液可細(xì)微污濁,顯微鏡下那些細(xì)微的點(diǎn)狀物數(shù)量十分多,細(xì)微活動(dòng),細(xì)胞雖然能夠成長但繁殖速度卻顯著減慢,并且細(xì)胞狀態(tài)欠好,邊際不清楚,細(xì)胞不透亮。他們與細(xì)胞可共生但會(huì)與細(xì)胞爭奪養(yǎng)分。這種共生是十分普遍的,但他們的數(shù)量小,細(xì)胞站優(yōu)勢所以不會(huì)影響到細(xì)胞的正常成長,只有當(dāng)他們抵達(dá)必定的數(shù)量時(shí)就會(huì)影響到細(xì)胞的成長,終形成惡性循環(huán)。
6. 細(xì)菌:細(xì)菌在普通倒置顯微鏡下為黑色細(xì)沙狀,依據(jù)感染細(xì)菌的不同,可有不同的外形,培育液一般會(huì)污濁變黃,對(duì)細(xì)胞成長影響顯著。
現(xiàn)在,世界上已有幾十種細(xì)胞都被 HeLa 細(xì)胞所污染,致使許多試驗(yàn)宣告無效。非細(xì)胞培育物所形成的化學(xué)成分的污染也偶有發(fā)生,大多是因?yàn)榧?xì)胞培育所需物品清洗消毒不*而帶入一些有毒化學(xué)物質(zhì)所造成的。
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