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技術(shù)文章

在科研中關(guān)于血清存在一些常見的問題!

閱讀:99發(fā)布時間:2019-9-5

科研血清是指血液凝結(jié)后,在血漿中除掉纖維蛋白原分離出的淡黃色通明液體或指纖維蛋白已被除掉的血漿。其主要效果是供給根本營養(yǎng)物質(zhì)、供給激素和各種成長因子、供給結(jié)合蛋白、供給促觸摸和伸展因子使細胞貼壁免受機械損傷、對培育中的細胞的起到某些維護效果。

科研血清是由血漿去除纖維蛋白原而構(gòu)成的一種很復(fù)雜的混合物,其組成成份雖大部分已知,但還有一部分尚不清楚,且血清組成及含量常隨供血動物的性別、年齡、生理條件和營養(yǎng)條件不同而異。

問題一:為什么貯存在冰箱中的血清會呈現(xiàn)沉淀?
答:咱們的胎牛血清沒有預(yù)老化,貯存在2-8℃時,血清中的各種蛋白和脂蛋白(如冷凝集素、纖維蛋白原、玻粘連蛋白等)可能聚集而構(gòu)成沉淀或可見的混濁。這應(yīng)該不會影響血清的品質(zhì)。引薦在-20℃貯存胎牛血清,防止重復(fù)凍融。
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問題二:有必要做熱滅活嗎?
答:實驗顯示,通過正確處理的熱滅活血清,對大多數(shù)的細胞而言是不需要的。經(jīng)此處理過的血清對細胞的成長只要微小的促進,或*沒有任何效果,甚至一般由于高溫處理影響了血清的品質(zhì),而構(gòu)成細胞成長速率的下降。而通過熱處理的血清,沉淀物的構(gòu)成會明顯的增多,這些沉淀物在倒置顯微鏡下觀察,像是“小黑點”,常常會讓研討者誤以為是血清遭受污染,而把血清放在37 ℃環(huán)境中,又會使此沉淀物更增多,使研討者誤認為是微生物的擴增。 因此咱們主張您,若非有必要,您能夠不需要做熱處理這一步。如此一來,不但節(jié)省您寶貴的時間,更保證血清的品質(zhì)!

問題三:血清凍結(jié)后發(fā)現(xiàn)有絮狀沉淀物呈現(xiàn),該怎么處理?
答:血清中沉淀物的呈現(xiàn)有許多種原因,但遍及的原因是由于血清中脂蛋白的變性所構(gòu)成,血纖維蛋白(構(gòu)成凝血的蛋白之一)在血清凍結(jié)后,也會存在于血清中,亦是構(gòu)成沉淀物的主要原因之一。但這些絮狀沉淀物,并不影響血清自身的品質(zhì)。 若您欲去除這些絮狀沉淀物,能夠?qū)⒀宸盅b至無菌離心管內(nèi),以400g略微離心,上清液即可接著參加培育基內(nèi)一起過濾。咱們不主張您以過濾的辦法去除這些絮狀沉淀物,由于它可能會堵塞您的過濾膜。

問題四:保存血清恰當?shù)霓k法是怎樣的呢?
答:咱們主張血清應(yīng)保存在-5℃至-2O℃。但是,若存放于4℃時,請勿超過一個月。若您一次無法用完一瓶,主張您無菌分裝血清至恰當?shù)臏缇萜鲀?nèi),再放回冷凍。

問題五:怎么凍結(jié)血清才不會使產(chǎn)品品質(zhì)受損?
答:咱們主張您將血清從冷凍箱取出后,先置于2~8℃冰箱使之融解,然后在室溫下使之全融。但有必要留意的是,融解過程中有必要規(guī)矩地搖晃均勻。

問題六:為什么要熱滅活科研血清?
答:加熱能夠滅活補體體系。發(fā)動的補體參與溶解細胞事情,刺激平滑肌縮短,細胞和血小板釋放組胺,發(fā)動淋巴細胞和巨噬細胞。在免疫學研討,培育ES細胞,昆蟲細胞平和滑肌細胞時,引薦使用熱滅活血清。


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