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上海通蔚實(shí)業(yè)有限公司
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閱讀:144發(fā)布時(shí)間:2019-8-8
試驗(yàn)操作中,每一個(gè)小細(xì)節(jié)都直接決議著試驗(yàn)的成功用與否,所以每一個(gè)過程都不能大意,以下內(nèi)容針對(duì)細(xì)胞因子ELISA試劑盒的試驗(yàn)操給出一些小主張:
1、每次試驗(yàn)測(cè)定的一起做標(biāo)準(zhǔn)曲線,。如標(biāo)本中待測(cè)物質(zhì)含量過高(樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔zui高濃度的OD值),請(qǐng)先用樣品稀釋液稀釋必定倍數(shù)(n倍)后再測(cè)定,計(jì)算時(shí)請(qǐng)zui后乘以總稀釋倍數(shù)(×n)。
2、制造試劑時(shí),要用旋渦混合儀混勻。加入孔內(nèi)的試劑,充沛混勻?qū)y(cè)試成果尤為重要,運(yùn)用微量振蕩器(運(yùn)用zui低頻率),如無微量振蕩器,可在反響前手藝悄悄晃動(dòng)酶標(biāo)板1分鐘,例如做圓周動(dòng)作,使加入孔中的反響液混勻。
3、從2-8℃取出的試劑盒,在開啟試劑盒之前要室溫平衡至少30分鐘。酶標(biāo)包被板開封后如未用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。
4、嚴(yán)格按照說明書的操作進(jìn)行,試驗(yàn)成果斷定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn)。
5、不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號(hào)的試劑不要混用。保質(zhì)前運(yùn)用。
6、試驗(yàn)用酶標(biāo)儀應(yīng)嚴(yán)格按運(yùn)用說明書標(biāo)準(zhǔn)操作,并在運(yùn)用前充沛預(yù)熱。
7、手藝洗板應(yīng)注意:甩掉酶標(biāo)板內(nèi)的液體;在試驗(yàn)臺(tái)上鋪墊幾層吸水紙,酶標(biāo)板朝下用力拍幾次;將稀釋后的洗滌液至少0.35ml注入孔內(nèi),浸泡1-2分鐘。根據(jù)需要,重復(fù)此過程數(shù)次。主動(dòng)洗板:如果有主動(dòng)洗板機(jī),應(yīng)在嫻熟運(yùn)用后再用到正式試驗(yàn)過程中。
8、底物B對(duì)光敏感,防止長(zhǎng)時(shí)間暴露于光下。
9、為防止穿插污染,要防止重復(fù)運(yùn)用手中的吸頭和封板膜。
10、所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按生物廢棄物處理。停止液為2M硫酸,運(yùn)用時(shí)必須注意安全。
11、各過程加樣均應(yīng)運(yùn)用加樣器,并常常校準(zhǔn)其準(zhǔn)確性,以防止試驗(yàn)誤差。一次加樣時(shí)間控制在5分鐘內(nèi),如標(biāo)本數(shù)量多,推薦運(yùn)用排槍加樣。
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