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閱讀:126發(fā)布時(shí)間:2019-7-9
ELISA試劑盒有著準(zhǔn)確性高、靈敏度高、特異性強(qiáng)等很多的優(yōu)點(diǎn),它在檢測抗體、抗原等方面有很好的應(yīng)用,深受廣大用戶朋友的喜愛。
基本原理:
1、將特定抗體(一抗)結(jié)合到某種固相載體表面,并保持其免疫性。一抗是待測抗體的抗體,識別待測抗體。
2、二抗是一種與酶偶聯(lián)的抗體,既保留了其免疫活性,又保留了酶的活性。二抗識別并結(jié)合待測抗體。
3、測定時(shí),固定的一抗先與樣品稀釋液反應(yīng),將樣品中待測抗體固定;洗滌后再與二抗反應(yīng)。每一步之間都要進(jìn)行洗滌。
4、加入底物,酶作用底物,使之變色。底物被酶催化變?yōu)橛猩a(chǎn)物
5、產(chǎn)物的量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量直接相關(guān),故可根據(jù)顏色反應(yīng)的深淺有無定性或定量分析。
洗滌不是反應(yīng)步驟,卻是決定成敗的關(guān)鍵。目的是洗去反應(yīng)液中沒有與固相抗體結(jié)合的物質(zhì)以及在反應(yīng)中非特異性吸附于固相載體的干擾物質(zhì)。
簡單來說:
就是將已知抗體固定→加入待測抗體與已知抗體結(jié)合→再加入帶有酶的二抗與待測抗體結(jié)合→加入酶底物,使底物變色。產(chǎn)物顏色的變化∝酶含量∝待測抗體含量,由此間接檢測抗體的含量。
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