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保存血清時(shí)的有哪些值得注意的事項(xiàng)?

閱讀:168發(fā)布時(shí)間:2019-5-30

血清,指血液凝結(jié)后,在血漿中除掉纖維蛋白原別離出的淡黃色透明液體或指纖維蛋白原已被除掉的血漿。其主要效果是供給基本營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)、供給激素和各種成長(zhǎng)因子、供給結(jié)合蛋白、供給促觸摸和伸展因子使細(xì)胞貼壁免受機(jī)械損傷、對(duì)培養(yǎng)中的細(xì)胞起到某些維護(hù)效果。
血清的保存應(yīng)該注意以下幾點(diǎn):
(1)熱滅活是指56℃, 30分鐘加熱已*凍結(jié)的血清.加熱過(guò)程中須規(guī)矩?fù)u晃均勻.此熱處理的意圖是使血清中的補(bǔ)體成分(complement)滅活.除非有必要,一般不建議作此熱處理,因?yàn)闊崽幚頃?huì)形成血清沉積物明顯增多,而且還會(huì)影響血清的質(zhì)量.補(bǔ)體參加反應(yīng)有:細(xì)胞毒效果, 平滑肌細(xì)胞縮短, 肥大細(xì)胞和血小板開(kāi)釋組胺, 增強(qiáng)吞噬效果, 促進(jìn)淋巴細(xì)胞和巨噬細(xì)胞發(fā)生化學(xué)趨化和活化.
(2)需求長(zhǎng)期保存的血清有必要貯存于-20℃ - 70℃ 低溫冰箱中.4℃冰箱中保存時(shí)間切勿超越1個(gè)月.因?yàn)檠褰Y(jié)冰時(shí)體積會(huì)增加約10%,因此,血清在凍入低溫冰箱前,有必要預(yù)留一定體積空間,否則易發(fā)生污染或玻璃瓶?jī)隽?br />(3)瓶裝血清凍結(jié)需采用逐步凍結(jié)法:-20℃ 至 -70℃ 低溫冰箱中的血清放入4℃冰箱中溶解1天.然后移入室溫,待全部溶解后再分裝.在溶解過(guò)程中需不斷輕輕搖晃均勻(小心勿形成氣泡),使溫度與成分均一,減少沉積的發(fā)生.切勿直接將血清從-20℃進(jìn)入37℃凍結(jié),這樣因溫度改動(dòng)太大,容易形成蛋白質(zhì)凝集而呈現(xiàn)沉積.
(4)一般廠商供給的血清為無(wú)菌,無(wú)需再過(guò)濾除菌.如發(fā)現(xiàn)血清有懸浮物,則可將血清加入培養(yǎng)液內(nèi)一同過(guò)濾,切勿直接過(guò)濾血清.
(5)血清中的沉積物 絮狀物:主要是血清中的脂蛋白變性及凍結(jié)后血清中纖維蛋白形成,這些絮狀物不會(huì)影響血清本身的質(zhì)量.可用離心3000rpm, 5分鐘去除,也可不用處理. 顯微鏡下"小黑點(diǎn)":通過(guò)熱處理過(guò)的血清,沉積物的形成會(huì)明顯增多.有些沉積物在顯微鏡下調(diào)查象"小黑點(diǎn)",常誤認(rèn)為血清受污染.一般情況下,此小黑點(diǎn)不會(huì)影響細(xì)胞成長(zhǎng),但假如懷疑血清質(zhì)量,則應(yīng)立即停止使用,替換另一批號(hào)的血清.
(6)切勿將血清在37℃放置太久,否則血清會(huì)變得污濁,一起血清中的有效成分會(huì)損壞而影響血清質(zhì)量.


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