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ELISA檢驗(yàn)中陽(yáng)性對(duì)照品和陰性對(duì)照品

閱讀：155發(fā)布時(shí)間：2019-3-15

elisa試劑盒陽(yáng)性對(duì)照品（positive control）和陰性對(duì)照品（negative control）是檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)有效性的控制品，同時(shí)也作為判斷結(jié)果的對(duì)照，因此對(duì)照品，特別是陰性對(duì)照品的基本組成應(yīng)盡量與檢測(cè)標(biāo)本的組成相一致。以人血清為標(biāo)本的測(cè)定，對(duì)照品也為人血清，因?yàn)檎Ｈ搜逶诟鞣Nelisa模式中可產(chǎn)生不同程度的本底。

 

由于大量正常人血清較難得到，國(guó)外elisa試劑盒中的對(duì)照品多以復(fù)鈣人血漿（recalcified human plasma）為原料，即在血漿中加入鈣離子，使其中的纖維蛋白質(zhì)凝固，除去凝塊后所得的液體，其組成與血清相似。

 

陰性對(duì)照品須現(xiàn)行檢測(cè)，確定其中不含待測(cè)物質(zhì)。例如檢測(cè)HBsAg的陰性對(duì)照品中不可含HBsAg，抗HBs也是陰性。陽(yáng)性對(duì)照品多以含蛋白保護(hù)劑的緩沖液為基質(zhì)，其中加入一定量的待檢物質(zhì)，此量在Elisa試劑盒說(shuō)明書中標(biāo)明。

 

加入的量應(yīng)與試劑的敏感度相稱，在測(cè)定中得到的吸光值與受檢的標(biāo)本吸光值比較，可對(duì)標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量有一個(gè)粗略的估值。檢測(cè)HBsAg的elisa試劑盒檢測(cè)敏感度約為0.5ng/ml，陽(yáng)性對(duì)照品中HBsAg含量約為10ng/ml。在對(duì)照品中一般加入抗生素和防腐劑，以利保存。


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