ELISA試劑盒在試驗(yàn)室現(xiàn)已適當(dāng)遍及，絕大多數(shù)ELISA試劑盒都是用于檢測未知樣本中抗原的濃度。用試劑盒當(dāng)然比自己漸漸摸條件快得多，ELISA試劑盒不只能夠讓試驗(yàn)更便當(dāng)，往往還愈加準(zhǔn)確。現(xiàn)在市面上的ELISA試劑盒既有國產(chǎn)也有進(jìn)口，數(shù)量繁復(fù)令人眼花繚亂，怎樣才能選出zui適用的產(chǎn)品呢？上海信帆通知你。
1. 試驗(yàn)類型
ELISA試劑盒有多種類型，不過它們都有一個一起特點(diǎn)，就是進(jìn)行抗原捕獲。一般捕獲方法包含將抗原吸附到微孔板或許用微孔板上的抗體進(jìn)行捕獲。In-cell ELISA和酶聯(lián)免疫斑點(diǎn)ELISPOT是兩種特別的類型，In-cell ELISA需求將微孔板中培育的細(xì)胞進(jìn)行固定和通透化，然后再用抗體原位檢測。ELISPOT有點(diǎn)像蛋白印跡Western blot，先在帶膜的微孔板中培育細(xì)胞，然后在膜上檢測細(xì)胞排泄的抗原形成斑點(diǎn)。此外，我們還需求依據(jù)本身需求挑選96孔板或是384孔板進(jìn)行ELISA試驗(yàn)。
一般人們運(yùn)用雙抗夾心法進(jìn)行ELISA試驗(yàn)，雙抗夾心法中抗原被夾在捕獲抗體和檢測抗體之間，這種辦法既活絡(luò)又有用，受到了許多研究者的青睞。不過有時候雙抗夾心法并不是好的挑選，例如有時候抗原特別小讓兩個大抗體難以附著，又或許抗體只要一個抗體結(jié)合位點(diǎn)。在上述情況下，競賽性ELISA就更為適用，這種辦法是選用帶符號的純化抗原與樣本中無符號的抗原進(jìn)行競賽，以結(jié)合捕獲抗體。
2. 抗體類型
ELISA試劑盒單克隆抗體和多克隆抗體都能夠用于ELISA，實(shí)際上有時候二者結(jié)合作用更好。例如，關(guān)于雙抗夾心法而言，用多抗進(jìn)行捕獲而單抗進(jìn)行檢測有時更有幫助。多抗能夠保證捕獲一切抗原，隨后單抗再特異性檢測具有特定抗原表位的抗原。
雙抗夾心法ELISA中 捕獲抗體與檢測抗體（不管多抗還是單抗）的配對很有考究。我們不期望捕獲抗體與檢測抗體競賽抗原上的同一位點(diǎn)，為此我們就需求保證捕獲抗體和檢測抗體所識 別的抗原表位不存在堆疊。如果捕獲抗體和檢測抗體之間發(fā)生了抵觸，就會對試驗(yàn)成果發(fā)生較大影響。要防止這一問題，我們能夠挑選購買“matched pair"的捕獲/檢測抗體對，這些打包在一起的抗體是商家經(jīng)過驗(yàn)證才引薦的好組合，
3. 穿插反響
如果抗體間發(fā)生抵觸或穿插反響就會影響整個試驗(yàn)的特異性。其間抗體來歷所帶來的兼容性就是穿插反響的一個要素。盡管現(xiàn)在購買源自動物的抗體越來越簡單，我們?nèi)杂斜匾姓J(rèn)一下是否會發(fā)生穿插反響的問題。在用雙抗夾心法進(jìn)行ELISA檢測時，檢測用的二抗必須特異性針對檢測一抗，而不能與捕獲抗體起反響。如果檢測用二抗與捕獲抗體結(jié)合，試驗(yàn)特異性就會大打折扣。一般我們選用源自不同宿主的捕獲抗體和檢測一抗，來防止上述問題。
與此同時，了解試劑盒中供給的buffer也是有必要的（例如washing buffer和blocking buffer），避免這些buffer含有可能影響抗原抗體相互作用的組分，使檢測成果收到影響。
4. 檢測方法
如今檢測ELISA有許多途徑，我們能夠依據(jù)自己的偏好進(jìn)行挑選。一般ELISA檢測的是酶促反響的可溶性產(chǎn)品，抗體上結(jié)合有相應(yīng)的酶（例如一般運(yùn)用的辣根過氧化物酶HRP），而反響體系中添加有相應(yīng)的底物（如3，3-二氨基聯(lián)苯胺DAB）。這種酶促反響生成具有特征性的色彩，能夠經(jīng)過分光光度計進(jìn)行檢測，堿性磷酸酶AP也是一種常用酶。酶能夠結(jié)合在一抗上，也能夠結(jié)合在二抗上，還能夠運(yùn)用鏈霉親和素符號的酶與親和素符號的一抗結(jié)合。此外ELISA的成果檢測還包含放射性檢測、熒光檢測、化學(xué)發(fā)光或顯色法檢測等。
上述四點(diǎn)ELISA試劑盒打開來講都足以大做文章，因此如果您對考慮購買的ELISA試劑盒還有任何疑問，都能夠直接向本公司咨詢。各大商家的上也有相應(yīng)的技術(shù)資料供給，您能夠從中獲取有價值的產(chǎn)品信息。
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