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間接法ELISA不能直接用酶符號(hào)的原因

閱讀：251發(fā)布時(shí)間：2017-8-14

ELISA試劑盒在ELISA試驗(yàn)中，用直接法測(cè)定抗體，不能直接將待測(cè)抗體直接用酶符號(hào)，然后直接加底物。而要加酶標(biāo)抗抗體呢？
ELISA試劑盒如果將酶符號(hào)到待測(cè)抗體上，相對(duì)經(jīng)典的直接法愈加繁瑣，而且您在探索符號(hào)條件時(shí)不能確保操作失誤導(dǎo)致待測(cè)抗體失活；酶標(biāo)二抗現(xiàn)在是現(xiàn)已產(chǎn)品化了的，被大規(guī)模出產(chǎn)，購買后使用方便。如果你的直接做的好的話，方法被優(yōu)化了后，一抗二抗顯色，一共的時(shí)刻加起來，出成果不會(huì)超越2-3小時(shí)。
能夠用直接ELISA法，就是用抗體包板，在抗原上符號(hào)酶，然后顯色，這樣與直接法比較就減少了一步，縮短了時(shí)刻。
可是，ELISA試劑盒間接法和直接法，他們各有優(yōu)缺點(diǎn)，需求依據(jù)試驗(yàn)具體要求而定。
1.待測(cè)抗體一般是免疫后產(chǎn)生的抗體，其中有免疫失敗和抗體過少等要素存在，用酶符號(hào)有許多不確定性，如用酶符號(hào)前期有測(cè)不出效價(jià)的可能，形成不必要的困惑。
2.ELISA酶聯(lián)免疫中酶標(biāo)抗抗體和抗體結(jié)合后有巨大的信號(hào)擴(kuò)展效果，能夠?qū)⑿盘?hào)擴(kuò)展千倍以上，適合于較低抗體量的測(cè)定。
3.ELISA試劑盒篩出單抗后能夠考慮直接酶標(biāo)抗體，不過在確定測(cè)定體系上要費(fèi)不少功夫。

 


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