在樹立ELISA試劑盒辦法作反響動力學(xué)研討時，實(shí)驗標(biāo)明，兩次抗原抗體反響通常在37℃經(jīng)1～2小時，產(chǎn)物的天然生成可達(dá)高峰。濕盒應(yīng)先放在保溫箱中預(yù)溫至劃定的溫度，特別是在氣溫較低的時候更應(yīng)如斯?？乖贵w反響的完結(jié)需求有必定的溫度和時刻，這一保溫進(jìn)程稱為溫育，有人稱之為孵育，在ELISA試劑盒中似不恰當(dāng)。這就是為何ELISA反響老是需求必定時刻的溫育。為加速反響，可前進(jìn)反響的溫度，有些實(shí)驗在43℃進(jìn)行，但不宜選用更高的溫度。ELISA屬固相免疫測定，抗原、抗體的只在固相表面上發(fā)作。
ELISA試劑盒溫育常選用的溫度有43℃、37℃、室溫柔4℃等。室溫溫育時要平置于操作臺上即可。這是一個逐漸平衡的進(jìn)程，因而需經(jīng)分散才干到達(dá)反響的終點(diǎn)。通常有兩次抗原抗體反響，即加標(biāo)本和加酶物后。不管是水浴仍是濕盒溫育，反響板均不宜疊放，以保證各板的溫度都能敏捷平衡。以抗體包被的夾心法為例，參加板孔中的標(biāo)本，其間的抗原并不是都有平等的和固相抗的時機(jī)，只要zui靠近孔壁的一層溶液中的抗原直接與抗體觸摸。37℃是實(shí)驗室中常用的保溫溫度，也是大多數(shù)抗原抗體的適宜溫度。
保溫的方法除有的ELISA試劑盒儀器附有特制的電熱塊外，通常均選用水浴，可將ELISA試劑盒板置于水浴箱中，ELISA板底應(yīng)貼著水面，使溫度敏捷平衡。為避免蒸發(fā)，板上應(yīng)加蓋，也可用塑料貼封紙或保鮮膜籠蓋板孔，此刻可讓反響板漂浮在水面上。若用保溫箱，應(yīng)放在濕盒內(nèi)，濕盒要選用傳熱性杰出的資料如金屬等，在盒底墊濕的紗布，zui終將ELISA板放在濕紗布上。應(yīng)留心溫育的溫度和時刻應(yīng)按劃定力求正確。抗原抗體反響4℃更為*，在放射免疫測定中多使反響在冰箱中過夜，以構(gòu)成zui多的沉積。室溫溫育的反響，操作時的室溫應(yīng)嚴(yán)厲約束在劃定的范圍內(nèi)，尺度室溫溫度是指20～25℃，但具體操作時可根據(jù)仿單的請求操控溫育。在這以后參加的酶符號抗體與固相抗原的也相同如斯。為保證這一點(diǎn)，一個人操作時，一次不宜多于兩塊板一起測定.。但因所需時刻太長，通常不予選用。
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