因而，這類ELISA試劑盒規(guī)格，如N<0.05<>（或別的數(shù)值），則按0.05核算，不然將呈現(xiàn)假陽性成果。此本底的深淺因試劑的構(gòu)成和試驗的條件不一樣而異，因而試驗中有必要加測陰性對照。每批測驗均須用一系列不一樣濃度的參考規(guī)范品在一樣的條件下制造規(guī)范曲線。測定大分子量物質(zhì)的夾心法ELISA試劑盒，規(guī)范曲線的規(guī)模通常較寬，曲線zui高點的吸光度可接近2.0，制作時常用半對數(shù)紙，以檢查物的濃度為橫坐標(biāo)，以吸光度為縱坐標(biāo)，將各濃度的值逐點連接，所得曲線通常呈S形，其頭、尾部曲線趨于平坦，*較呈直線的部分是的檢查區(qū)域。
ELISA試劑盒測定小分子量物質(zhì)常用競爭法，其規(guī)范曲線中吸光度與受檢物質(zhì)的濃度呈負(fù)相關(guān)。規(guī)范曲線的形狀因。在試驗條件（包含試劑）較難確保穩(wěn)定的情況下，這種判別法較為適宜。在得出標(biāo)本（ S）和陰性對照（N）的A值后，核算S/N值。也有寫作P/N的，這兒的P不代表陽性(positive)，而是患者（pati ent）的縮寫，不應(yīng)誤解。ELISA試劑盒為防止混雜，更宜用S/N表明。在早期的間接法ELISA中，有些作者定出S/N為陽性規(guī)范，現(xiàn)多為各種測定所沿襲。
實際上每一測ELISA試劑盒定體系應(yīng)該用試驗求出各自的S/N的閾值。更應(yīng)注意的是，N所代表的陰性對照是不含受檢物質(zhì)的人血清。有的試劑盒中所設(shè)陰性對照為不含蛋白質(zhì)或蛋白質(zhì)含量較底的緩沖液，致使反響后發(fā)生的本底也許較正常人血清的本底低得多。ELISA試劑盒陰性對照的構(gòu)成應(yīng)為不含受檢物的正常血清或類似物。在用肉眼判別成果時，更宜用顯色深于陰性對照作為標(biāo)本陽性的目標(biāo)。
