ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)在用肉眼判別成果時，更宜用顯色深于陰性對照作為標(biāo)本陽性的目標(biāo)。
也有寫作P/N的，這里的P不代表陽性（positive），而是患者（patient）的縮寫，不該誤解。
為避免混雜，更宜用S/N表示。在前期的間接法ELISA中，有些作者定出S/N為陽性標(biāo)準(zhǔn)，現(xiàn)多為各種測定所沿用。
目視法簡捷明晰，但頗具主觀性。ELISA試劑盒在條件許可下，應(yīng)該用比色計(jì)測定吸光值，這么能夠得到客觀的數(shù)據(jù)。
先讀出標(biāo)本（sample，S）、陽性對照（P）、和陰對照（N）的吸光值，然后進(jìn)行核算。
核算方法有多種，大致可分為陽性斷定值法和標(biāo)本與陰性對照比值法兩類。
在實(shí)驗(yàn)條件（包含試劑）較難確保穩(wěn)定的情況下，這種判別法較為適宜。
在得出標(biāo)本（S）和陰性對照（N）的A值后，核算S/N值。
實(shí)際上每一測定體系應(yīng)該用實(shí)驗(yàn)求出各自的S/N的閾值。更應(yīng)留意的是，N所代表的陰性對照是不含受檢物質(zhì)的人血清。
ELISA試劑盒中的陰性對照品為不含HBsAg的復(fù)鈣人血漿，陽性對照品HBsAg的含量標(biāo)明為P=9±2ng/ml。
每次實(shí)驗(yàn)設(shè)2個陽性對照和3個陰性對照。
有的試劑盒中所設(shè)陰性對照為不含蛋白質(zhì)或蛋白質(zhì)含量較底的緩沖液，致使反響后發(fā)生的本底可能較正常人血清的本底低得多。
陽性斷定值按下式核算：陽性斷定值=NCX+0.05，標(biāo)本A＞陽性斷定值的為陽性，小于陽性斷定值的為陰性。
應(yīng)留意的是，式中0.05為該試劑盒的常數(shù)，只適合于該特定條件下，而不是對各種試劑均可通用。
因而，這類試劑盒規(guī)，如N<0.05（或別的數(shù)值），則按0.05核算，否則將出現(xiàn)假陽性成果。
因而實(shí)驗(yàn)中有必要加測陰性對照。
陰性對照的組成應(yīng)為不含受檢物的正常血清或類似物。
請求實(shí)驗(yàn)條件非常穩(wěn)定，試劑的制備有必要標(biāo)準(zhǔn)化，陽性和陰性的對照品應(yīng)契合必定的標(biāo)準(zhǔn)，須配用精細(xì)的儀器，并嚴(yán)厲按規(guī)則操作。
陽性斷定值公式中的常數(shù)是在這特定的體系中經(jīng)過對很多標(biāo)本的實(shí)驗(yàn)檢查而得到的?，F(xiàn)舉某種檢查HBsAg的試劑盒為例。
測得A值后，先核算陰性對照A值的平均數(shù)（NCX）和陽性對照A值的平均數(shù)（PCX），兩個平均數(shù)的差（P-N）有必要大于一個特定的數(shù)值（例0.400），實(shí)驗(yàn)才有用。
ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)3個陰性對照A值均應(yīng)≥0.5×NCX，并≤1.5×NCX，如其中之一超出此規(guī)模，則棄去，而已另兩個陰性對照從頭核算NCX；如有兩個陰性對照A值超出以上圍，ELISA試劑盒則該次實(shí)驗(yàn)無效。
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