一、非特異性染色的識別
常出現(xiàn)在組織邊緣、膠原纖維及血漿滲出處，壞死組織及固定不良的組織中心處。表現(xiàn)為彌漫性，均勻性
的背景染色。也可以是隨機(jī)分布的陽性反應(yīng)產(chǎn)物點(diǎn)、團(tuán)或塊狀。
二、非特異性
1. Ig 與 Fc 受體結(jié)合
多見于冰凍切片（特別是淋巴造血組織，淋巴細(xì)胞，單核細(xì)胞，組織細(xì)胞表面多），主要是和二抗反應(yīng)，因
為一抗一般稀釋度均較大，因此 Fc 受體的干擾基本不存在。由于福爾馬林固定破壞了大部分的 Fc 受體，
所以石蠟切片不多見。
避免方法：
① 用以二抗相同種族的正常血清封閉切片；
② 用不含 Fc 段的抗體，但價格貴（V 區(qū)，C1區(qū)不含 Fc 段，用 Pepsin 消化）
2．靜電吸附
抗體是一種帶負(fù)電荷的球蛋白，容易和帶正電荷的組織相結(jié)合，如膠原纖維。
避免方法：
① 盡量稀釋一抗
② 降低抗體的電荷，如用2.5%NaCl，0.05mTBS 代替 PBS
③ 用去垢劑 如 triton-100處理切片。 Tween-20等
3.二抗與組織中的 Ig 結(jié)合
如羊抗兔的二抗，二抗可以標(biāo)本中（人）Ig 發(fā)生交叉反應(yīng)，科學(xué)上越接近的動物，交叉反應(yīng)越明顯，如人
與猴，兔與豚鼠。
避免方法：用與待測組織相同的5%的正常血清稀釋二抗。如人血清。
4．組織中殘存醛基與 Ig 的結(jié)合
如醛類固定后未能*的沖洗，殘流醛基可以和 Ig 結(jié)合。
避免方法：
① *沖洗；
② 0.02%的新鮮的硼氧化鉀液處理10分鐘后沖洗；
5．內(nèi)源性過氧化物酶
紅細(xì)胞，粒細(xì)胞的含量尤其高，鏡下可以識別，不要將其當(dāng)成陽性結(jié)果。
避免方法：
① 石蠟切片 0.3%雙氧水-甲醇溶液處理切片；
② 冰凍切片 3%雙氧水處理切片5分鐘（99：1）因?yàn)槲唇?jīng)固定包埋，大部分酶未被破壞；
③ 對于骨髓涂片用非過氧化物酶標(biāo)記的抗體
如堿性磷酸酶（AP）
↓
磷酸萘酯+水→α-萘酚+偶氮染料
↓
快蘭(fast blue)或快紅(fast red)
↓ ↓
蘭色 紅色
用明膠甘油封片，不能用含二甲苯的封片劑，溶于二甲苯。
6. 內(nèi)源性*
以 24mg/ml 的卵白素封片15分鐘；
7. 交叉反應(yīng)
PcAb 敏感性高，但特異性稍低，容易出現(xiàn)非特異性染色。避免方法：
① 盡可能稀釋抗體
② 盡可能用 McAb
三、 抗體zui大稀釋度的求法
zui大稀釋度的目的：
1.節(jié)約
2.特異性染色↑、非特異性染色↓（決定其zui大稀
會員1.png)