elisa原理  elisa法  人靶向核糖核酸酶
    產(chǎn)品名：人靶向核糖核酸酶（TR）ELISA試劑盒
    ：021—60449724， 
    產(chǎn)品規(guī)格：48T/96T 
    保存條件：2-8℃ 
    主要作用：研究使用 
    ELISA是酶聯(lián)接免疫吸附劑測定（ Enzyme-Linked Immunosorbnent Assay ）的簡稱。它是繼免疫熒光和放射免疫技術(shù)之后發(fā)展起來的一種免疫酶技術(shù)。此項(xiàng)技術(shù)自70年代初問世以來，發(fā)展十分迅速，目前已被廣泛用于生物學(xué)和醫(yī)學(xué)科學(xué) 的許多領(lǐng)域。 　　 
    ELISA原理 
    　　ELISA是以免疫學(xué)反應(yīng)為基礎(chǔ)，將抗原、牽9體的特異 性反應(yīng)與酶對底物的高效催化作用相結(jié)合起來的一種敏感性很高的試驗(yàn)技術(shù)。由于抗原、抗體的反應(yīng)在一種固相載體──聚苯乙烯微量滴定板的孔中進(jìn)行，每加入一 種試劑孵育后，可通過洗滌除去多余的游離反應(yīng)物，從而保證試驗(yàn)結(jié)果的特異性與穩(wěn)定性。在實(shí)際應(yīng)用中，通過不同的設(shè)計(jì)，具體的方法步驟可有多種。即:用于檢 測抗體的間接法（圖a）、用于檢測抗原的雙抗體夾心法（圖b）以及用于檢測小分子抗原或半抗原的抗原競爭法等等。比較常用的是ELISA雙抗體夾心法及 ELISA間接法。 　 
    試劑器材 
    　　1.　試劑 
    （1）　包被緩沖液（PH9.6 0.05M碳酸鹽緩沖液）: 
    NaCO3　1.59克　NaHCO3　 2.93克　　加蒸餾水至1000ml　　 
     （2）　洗滌緩沖液（PH7.4 PBS）：0.15M　KH2PO4 0.2克　Na2HPO4·12H2O　2.9克　NaCl 8.0克KCl 0.2克 Tween-20 0.05％ 0.5ml 加蒸餾水至1000ml 
    （3）　稀釋液:牛血清白蛋白（BSA） 0.1克　加洗滌緩沖液至100ml　或以羊血清、兔血清等 血清與洗滌液配成5～10％使用。 
    （4）　終止液（2M H2SO4）：蒸餾水178.3ml，逐滴加入濃硫酸（98％）21.7ml。 
    （5）　底物緩沖液（PH5.0磷酸棗檸檬酸）:0.2M Na2HPO4（28.4克／L） 25.7ml　0.1M 檸檬酸（19.2克／L） 24.3ml　加蒸餾水50ml。 
    （6）　TMB（四甲基聯(lián)苯胺）使用液:TMB（10mg／5ml無水乙醇） 0.5ml底物緩沖液（PH5.5） 10ml0.75％H2O2　32μl 
    （7）　ABTS使用液:ABTS　0.5mg　底物緩沖液（PH5.5） 1ml　3％H2O2　2μl 
    （8）　抗原、抗體和酶標(biāo)記抗體。 
    （9）　正常人血清和陽性對照血清。 
    2.　器材: 
    （1）　聚苯乙烯塑料板（簡稱酶標(biāo)板）40孔或96孔，ELISA檢測儀，50μl及100μl加樣器，塑料滴頭，小毛巾，洗滌瓶。 
    （2）　小燒杯、玻璃棒、試管、吸管和量筒等。 
    （3）　4℃冰箱，37℃孵育箱。 
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