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    本月已經(jīng)過去了三分之一，上海恒遠技術(shù)人員在上月底前對培養(yǎng)基做了一個總結(jié)分析，今天上午技術(shù)人員將分析結(jié)果發(fā)送給了我公司吳，下面我們就來看看實驗染料結(jié)合法，它的含量測定。
1. 基本原理 
考馬斯亮藍G-250具有紅色和青色兩種色調(diào)，在游離狀態(tài)下呈紅色型，一旦與蛋白質(zhì)結(jié)合就變?yōu)榍嗌氐膠ui大吸收波長從465nm移到595nm，測定595nm處光密度值的增加即可進行定量。
2. 標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制
分別在5個1.5ml appendoff管中各加入1μg/μl的BSA 0、1.25、2.5、5、10μl，以0.15mmol的NaCl補足至100μl，每管各加入考馬斯亮藍染料溶液1ml，室溫放置2min。用1cm光徑的微量比色杯測量，取A595吸光度值對標(biāo)準(zhǔn)蛋白濃度作圖，畫出標(biāo)準(zhǔn)曲線。
3. 樣品中培養(yǎng)基含量的測定 
將裂解液作二十倍稀釋后，按照標(biāo)準(zhǔn)曲線測定待測樣品的A595，從BSA標(biāo)準(zhǔn)曲線中確定待測樣品的濃度。
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