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恒遠公布白介素6(IL-6)的誘生條件及原理
閱讀:2632 發(fā)布時間:2013-6-3
白介素6(IL-6)的誘生
IL-6來源于單核細胞、成纖維細胞、膀胱癌細胞、骨肉瘤細胞等。IL-6是B細胞增殖和分化過程中起調(diào)節(jié)作用和誘導(dǎo)B細胞分泌的必需因子之一?!窘Y(jié)果判斷】1. 多發(fā)性硬化(MS)患者腦脊液中IL-6水平明顯升高,且與腦脊液中的細胞數(shù)、總蛋白、IgG均有顯著相關(guān)。
ID6由多種淋巴類和非淋巴類細胞產(chǎn)生,具有多種生物學(xué)功能,在機體的免疫應(yīng)答、骨髓造血及炎癥反應(yīng)中均起重要作用。
機體多種組織細胞如單核一巨噬細胞、T、B淋巴細胞、成纖維細胞、肝細胞、血管內(nèi)皮細胞和某些腫瘤細胞系均可產(chǎn)生IL-6(一些患者血清中也含有IL-6),可根據(jù)實驗?zāi)康倪x擇。
1.天然樣品 人血清經(jīng)56~C30min滅活后可用于檢測IL-6:
2.PHA誘導(dǎo)人外周血淋巴細胞 PHA刺激人外周血淋巴細胞培養(yǎng)3d后,收集細胞培養(yǎng)上清。
3.LPS誘導(dǎo)小鼠腹腔巨噬細胞 將小鼠腹腔巨噬細胞調(diào)整成2X106/mL,加人終濃度為20ug/mL的LPS,培養(yǎng)48h后收集細胞培養(yǎng)上清。
4.小鼠脾淋巴細胞 將小鼠脾淋巴細胞調(diào)整成5X106/mL,培養(yǎng)24h后,收集細胞培養(yǎng)上清。小鼠脾細胞可自發(fā)產(chǎn)生IL-6,或加入終濃度為3ug/mL的ConA作為誘生劑。
概述
白細胞介素或白介素(interleukin,IL)是一組細胞因子(分泌的信號分子)。zui早發(fā)現(xiàn)在白細胞中表達作為細胞間信號傳遞的手段。實際上,白細胞介素可以由多種細胞產(chǎn)生。免疫系統(tǒng)的功能,在很大程度上依賴于白細胞介素。一些罕見的白細胞介素缺陷不足都常出現(xiàn)自身免疫性疾病或免疫缺陷。IL-6是一種分子量為26kD的蛋白質(zhì),由184個氨基酸組成。zui初人們只發(fā)現(xiàn)其在白細胞中合成并在白細胞間發(fā)揮作用而命名。隨研究的不斷進展,人們逐漸發(fā)現(xiàn)不僅激活的淋巴細胞、單核巨噬細胞可以合成和分泌IL-6,而且骨髓細胞和部分腫瘤細胞等也可以產(chǎn)生IL-6。其作為一種機體在免疫應(yīng)答中產(chǎn)生的重要介質(zhì),具有多種生物學(xué)活性。IL-6是一種多效性細胞因子,能調(diào)節(jié)多種細胞功能,包括細胞增殖、細胞分化、免疫防御機制及血細胞生成等。IL-6與多種腫瘤發(fā)生、發(fā)展關(guān)系密切,它通過干預(yù)細胞的黏附性 和活動力、血栓形成、腫瘤特異性抗原的表達及腫瘤細胞的增殖,從而影響腫瘤的進展。它還能調(diào)節(jié)多種細胞功能,包括細胞增殖、細胞分化、免疫防御機制及血細胞生成等。實驗原理 用純化的抗體包被微孔板,制成固相載體,往包被抗IL-6抗體的微孔中依次加入標(biāo)本或標(biāo)準(zhǔn)品、生物素化的抗IL-6抗體、HRP標(biāo)記的親和素,經(jīng)過*洗滌后用底物TMB顯色。TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的IL-6呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),計算樣品濃度。
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