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ELISA代檢測的一些相關要求
閱讀:1803 發(fā)布時間:2014-9-12 朋友們都知道上海恒遠供應的R&D試劑盒是可以提高免費代檢測服務的,這一項服務有著一些規(guī)定與流程,不論是售前還是售后,都是要按照流程來進行的,一般來說,您將需檢測的標本寄來我公司之后,我們會在三至五天之內(nèi)為您檢測,結果出來后再將結果發(fā)送給您。下面就一起來看看ELISA代檢測的一些相關要求:
·產(chǎn)品有哪幾種規(guī)格?可檢測多少個樣本?
答:產(chǎn)品分為48T和96T兩種規(guī)格。
每次實驗的標準曲線一般設7個不同濃度,加上空白孔,標準曲線一共需要8個孔。因此,一個48T試劑盒zui多可以測定40個樣本(不做重復且一次用完),一個96T試劑盒zui多可以測定88個樣本(不做重復且一次用完)??梢愿鶕?jù)實際樣本數(shù)量和實驗計劃選擇合適的產(chǎn)品規(guī)格。
·產(chǎn)品的穩(wěn)定性如何?
答:在研發(fā)前期已通過嚴格的穩(wěn)定測試,發(fā)貨前亦須通過檢測并提供質檢報告,在市場上深受廣大客戶的贊許!
·貴公司有沒有酶活性檢測的試劑盒?
答:酶活力的測定實際上就是測定酶促反應的速率。酶活力的大小即酶含量的多少,可以用每克酶制劑或每毫升酶制劑含有多少酶單位來表示,單位是U/g或U/ml。
·一次ELISA實驗需要多長時間?
答:雙抗體夾心ELISA法一次實驗需要4-4.5小時,競爭ELISA法一次實驗需要2-2.5小時。
·血清樣本如何處理?
答:全血標本于室溫放置2小時或4℃guo夜后于1000×g離心20分鐘。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
·血漿樣本如何處理?
答:應根據(jù)標本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,于1000×g離心15分鐘,仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
·尿液樣本如何處理?
答:用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實行。
·細胞上清液樣本如何處理?
答:檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(1000×g)。仔細收集上清。檢測細胞內(nèi)的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復凍融,以使細胞破壞并放出細胞內(nèi)成份。離心10分鐘左右(5000×g)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
·組織樣本如何處理?
答:用預冷的PBS(0.01M,pH=7.4)沖洗組織,以去除殘留血液(勻漿中裂解的紅細胞會影響測量結果),稱重后將組織剪碎。將剪碎的組織與對應體積的PBS(一般按1:9的重量體積比,比如1g的組織樣本對應9mL的PBS,具體體積可根據(jù)實驗需要適當調整,并做好記錄。推薦在PBS中加入蛋白酶抑制劑)加入玻璃勻漿器中,于冰上充分研磨。為了進一步裂解組織細胞,可以對勻漿液進行超聲破碎,或反復凍融。zui后將勻漿液于5000×g 離心5~10分鐘,取上清檢測。
·為什么有的試劑盒是采用競爭ELISA法?
答:小分子抗原或半抗原因為缺乏可作夾心法的兩個以上的位點,因此不能用雙抗體夾心法進行測定,可以采用競爭法。其原理是標本中的抗原和固相載體上的抗原競爭生物素化抗體上的結合位點,標本中抗原量含量愈多,結合在固相上的生物素化抗體愈少,zui后的顯色也愈淺,即顯色深淺與樣本中的抗原濃度成反比。小分子激素、藥物等ELISA測定多用此法。
·用什么軟件處理ELISA檢測的數(shù)據(jù)比較好?
答:ELISA標準曲線擬合可以應用Curve Expert軟件進行數(shù)據(jù)分析。它使用非常方便,可以生成漂亮的曲線應用到論文之中。軟件可以在下載中心進行下載。
·試劑盒做的結果不理想怎么辦?
答:實驗結果不理想請及時與客服或,我們可以幫您一起分析實驗結果。如果僅憑實驗數(shù)據(jù)無法判斷,您可以將試劑盒發(fā)回給我們進行ELISA代檢測。如果是試劑盒本身的質量問題,可以為您退換貨;如果是實驗操作的問題,技術人員可以給您一些改進的建議。