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技術(shù)文章

上海恒遠(yuǎn)分析二乙酰試驗方法原理

閱讀:1506          發(fā)布時間:2014-8-27

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·原理  
    某些細(xì)菌如大腸桿菌等分解葡萄糖產(chǎn)生丙酮酸,繼而分解為甲酸、乙酸、乳酸等,使培養(yǎng)基PH值降至4.5以下,加入甲基紅指示劑呈紅色,此為陽性反應(yīng);若產(chǎn)酸量少或產(chǎn)生的酸進(jìn)一步轉(zhuǎn)化為醇、醛、氣體和水等,則培養(yǎng)基的酸堿度仍在PH 6.2以上,加入甲基紅指示劑呈現(xiàn)黃色,為陰性反應(yīng)。 
·材料 
[培養(yǎng)基]:葡萄糖蛋白胨水培養(yǎng)基。 
[菌  種]:大腸桿菌,產(chǎn)氣桿菌18~24小時瓊脂斜面培養(yǎng)物。 
[試  劑]:V-P試劑[40%氫氧化鉀水溶液,內(nèi)含0.3%肌酸、6%α-奈酚酒精溶液)。 
·方法 
① 分別接種大腸桿菌,產(chǎn)氣桿菌于兩支葡萄糖蛋白胨水中。 
② 置37℃培養(yǎng)48小時后,取出分別加入KOH1ml和α-奈酚溶液1ml,搖勻,靜置試管架上5~15分鐘。 
③ 觀察結(jié)果:培養(yǎng)液變?yōu)榧t色為陽性,不變色為陰性。 
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