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游離血紅蛋白測定原理及方法（血漿）
閱讀：4522 發(fā)布時間：2013-5-23游離血紅蛋白測定原理及方法（血漿）
實驗原理
血紅蛋白具有類過氧化物酶活性，可催化H2O2釋放新生態(tài)氧，使鄰甲聯(lián)苯胺氧化發(fā)生顏色變化，由無色zui終變?yōu)樗{紫色。根據(jù)顯色深淺與標準進行比較，可測出其含量。
實驗方法
材料：
1．2g/L鄰甲聯(lián)苯胺溶液
2．1%H2O2
3．10%醋酸溶液
4．分光光度計
方法：
1.抽取靜脈血2-3ml，枸櫞酸鈉抗凝，離心分離血漿。
2．按下表進行操作，用分光光度計，波長為530nm，以空白管調(diào)零，測定測定管的吸光度。
| 試劑 （ml） | 測定管 | 空白管 |
| 2 g/L鄰甲聯(lián)苯胺溶液 | 0.5 | 0.5 |
| 患者血漿 | 0.02 | / |
| 1% H2O2 | 0.5 | 0.5 |
| 混勻后室溫放置10min | ||
| 10%醋酸溶液 | 5.0 | 5.0 |
| 室溫放置10min | ||
注意事項
1.一切容器避免血紅蛋白污染；
2.采血要順利，器皿要干燥，檢測血漿要新鮮，及時分離，防止人為溶血；
3.鄰聯(lián)苯胺溶液具致癌性，檢測時要小心，廢液要妥善處理，以免污染；
4.雙氧水要新鮮配置，濃度要準確。
「臨床意義」 血漿游離血紅蛋白的增加是血管內(nèi)溶血的指征。假如血漿中游離血紅蛋白達到一定水平時（900～1000mg/L）就可由尿液排出，即伴有血紅蛋白尿癥，見于蠶豆黃、PNH、陣發(fā)性嚴寒性血紅蛋白尿，不穩(wěn)定血紅蛋白癥，冷凝集綜合征等。
自身免疫性溶血性貧血，鐮形細胞貧血及海洋性貧血血漿游離血紅蛋白可輕度可中度增加。
嚴重輸血反應，尤其是血型不合，可發(fā)生嚴重的輸血反應，使血漿游離血紅蛋白大幅度增加，可能對腎小管有毒性作用，引起嚴重腎臟損害，危及生命。
體外循環(huán)，如人工心肺，人工腎手術(shù)應用以后，醫(yī)學教|育網(wǎng)|收集整理紅細胞可被機械性大量破壞，也可使血漿游離血紅蛋白增高。
貯存庫血2～3周后，游離血紅蛋白可達500mg/L。
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