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你真的會(huì)保存抗體嗎?
閱讀:700 發(fā)布時(shí)間:2022-9-5抗體(antibody)是指機(jī)體由于抗原的刺激而產(chǎn)生的具有保護(hù)作用的蛋白質(zhì)。它(免疫球蛋白不僅僅只是抗體)是一種由漿細(xì)胞(效應(yīng)B細(xì)胞)分泌,被免疫系統(tǒng)用來(lái)鑒別與中和外來(lái)物質(zhì)如細(xì)菌、病毒等的大型Y形蛋白質(zhì),僅被發(fā)現(xiàn)存在于脊椎動(dòng)物的血液等體液中,及其B細(xì)胞的細(xì)胞膜表面。
抗體保存也是非常重要的,保存不好不僅影響質(zhì)量,而且關(guān)乎著實(shí)驗(yàn)的成敗,今天小編就給大家總結(jié)一下抗體保存的注意要點(diǎn)。
1.收到抗體后需先在 12000 rpm 離心 1-5 分鐘,再打開(kāi)管蓋進(jìn)行分裝和保存,如果抗體體積不足50 ul,可延長(zhǎng)離心時(shí)間至 5 分鐘,從而確??贵w全部離心下來(lái)。
2.對(duì)于大部分抗體,比較合適的保存方式是分裝后保存在-20℃或-80℃,也可4℃短暫保存1-2周,并不影響抗體活性。
①對(duì)絕大多數(shù)抗體來(lái)說(shuō),保存在-20℃即可。如果抗體在2周內(nèi)會(huì)使用,推薦在4℃保存,這是為了避免反復(fù)凍融對(duì)抗體活性的損害。如果要長(zhǎng)期保存則好是在-20℃或-80℃。當(dāng)然關(guān)鍵的是按照說(shuō)明書(shū)的推薦來(lái)進(jìn)行保存。但是,腹水形式的產(chǎn)品收到后需立即凍存,因?yàn)樵擃惍a(chǎn)品含有大量的蛋白酶,長(zhǎng)期在4℃保存會(huì)導(dǎo)致抗體的降解。
②分裝可以降低反復(fù)凍融對(duì)抗體活性的損害,同時(shí)也降低了由于多次從同一管中吸取抗體造成的污染可能性。分裝的量以一次實(shí)驗(yàn)用完為好,少不能少于10ul每份。因?yàn)榉盅b體積越小,抗體的濃度越可能會(huì)受到蒸發(fā)以及管壁吸附的影響。復(fù)融后的分裝抗體如果一次用不完,需將剩余母液保存在4℃,避免再凍起來(lái)。
③抗體工作液應(yīng)該當(dāng)天配制當(dāng)天用完,在4℃盡量不要超過(guò)1天。
④盡量將抗體保存在冰箱里層,而不是門(mén)上。且避免將抗體保存在自動(dòng)除霜冰箱中。
3.大部分抗體的運(yùn)輸條件:一般的運(yùn)輸過(guò)程需要1-2周的時(shí)間,所以是在4℃的條件下來(lái)完成的。4℃運(yùn)輸主要的目的是為了避免反復(fù)凍融對(duì)抗體活性的損害,如果使用干冰運(yùn)輸,那么收到時(shí)抗體是凍起來(lái)的,為了分裝就需要解凍,這就多了一次凍融的過(guò)程。所以運(yùn)輸過(guò)程中避免干冰運(yùn)輸。
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