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技術(shù)文章

如何配胰蛋白酶溶液

閱讀:1737          發(fā)布時間:2019-11-4

    在細胞培養(yǎng)中我們會經(jīng)常用到胰蛋白酶溶液。在試驗中胰蛋白酶的作用是使細胞間的蛋白質(zhì)水解從而使細胞離散。上海恒遠技shu支持部分特別整理這篇文章,告訴你如何配胰蛋白酶溶液。

    胰蛋白酶溶液的配制:

    (1)稱取胰蛋白酶粉末置燒杯中,先用少許D-Hanks平衡鹽溶液(pH7.2左右)調(diào)成糊狀,然后再補足D-Hanks平衡鹽溶液,攪拌混勻,置室溫4小時或冰箱過夜,并不斷攪拌振蕩;

    (2)次日,先用濾紙粗濾,再進行過濾除菌,分裝入瓶中,低溫冰箱保存?zhèn)溆?,常用濃度?.25%或0.125%。胰蛋白酶溶液偏酸,使用前可調(diào)用碳酸氫鈉溶液調(diào)pH至7.2左右。

    保存條件:配制好的胰蛋白酶溶液必須保存在-20℃冰箱中,以免分解失效。

    EDTA?4Na溶液

    EDTA是一種化學(xué)螯合劑,對細胞有一定的離觧作用,而且毒性小,價格低廉,使用方便。常用工作液濃度為0.02%。通常與0.25%的胰蛋白酶溶液按1:1混合使用(混合液)。注意:使用EDTA處理細胞后,一定要用Hanks液沖洗干凈,因殘留的EDTA會影響細胞生長。

    EDTA溶液配制:用無鈣、鎂的D-HBSS平衡鹽溶液溶解后,高壓蒸汽滅菌,分裝成小瓶,室溫或4℃冰箱保存。

    胰蛋白酶–EDTA?4Na溶液(0.05%胰蛋白酶,0.53mMEDTA?4Na)

    0.5g胰蛋白酶+0.2gEDTA?4Na+1LD-HBSS。-20℃冰箱中保存。

    上海恒遠的胰蛋白酶-EDTA消化液經(jīng)過濾除菌,可以直接用于培養(yǎng)細胞和組織的消化。具有方便快速、穩(wěn)定安全、細胞狀態(tài)好等特點。索萊寶特別提醒為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。

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