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胎牛血清中的脂肪酸如何去除?
閱讀:1366 發(fā)布時(shí)間:2019-1-16胎牛血清是常見的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)基營養(yǎng)液,在大部分試驗(yàn)中是不需要對(duì)胎牛血清中的脂肪酸進(jìn)行去除的,但是,在進(jìn)行某些特殊細(xì)胞培養(yǎng)的時(shí)候?yàn)榱吮WC實(shí)驗(yàn)的準(zhǔn)確性和我們要讀胎牛血清中的某些成分進(jìn)行去除。
常見的脂肪酸去除,我們一般用一下方法:
1、溶解:取適量的牛血潔白蛋白提取物,溶解于10倍的蒸餾水中,溶解溫度在23~27℃。 用濃度為0.2N的HCl,調(diào)治PH至3~3.5。
2、分析:充實(shí)溶解后的溶液牛血潔白蛋白移至冰水殽雜物中舉行冰水浴,同時(shí)連續(xù)攪拌,維持30min。
3、吸附:參加5%的活性炭,混勻,混懸液將混懸液移至冰水殽雜物中舉行冰水浴,同時(shí)連續(xù)攪拌,維持1小時(shí)。過濾,濾渣采取后再利用。
4、濃縮:濾液用0.2N的NaOH調(diào)治PH值至7.0,然后用20000分子量以下的超濾器舉行超濾濃縮。
5、凍干:將濃縮液按凍干曲線凍干,即將超濾后的濃縮液敏捷冷凍至-40℃,連續(xù)1小時(shí)左右,升到-25℃,連續(xù)10~20小時(shí),再遲鈍升溫至0℃,維持1~4小時(shí),升溫至生存溫度20℃,分裝為成品。
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