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  西北大學的高老師在操作ELISA試劑盒實驗的時候發(fā)現(xiàn)了一個問題，于是來電向恒遠生物銷售人員吳咨詢：加完顯色液(購買)顯色一定時間后，再加終止液（2M H2SO4，自己配制）后，立即測試其吸光度值，等過幾分鐘再測試吸光度值，發(fā)現(xiàn)兩次測得的吸光度值發(fā)生衰減。第二次均小于第一次。

    并且，加終止液時，從*條加到第12條后，測試發(fā)現(xiàn)，吸光度值從1-12條逐級衰減。前提是這12條酶標板都是同一種產(chǎn)品，并且包被相同蛋白。

    高老師向吳詳細的說明了實驗中出現(xiàn)的情況，吳對實驗的問題有了一定的了解，隨后安排技術(shù)人員為高老師去，為其解決這一問題，高老師恍悟道：原來ELISA吸光度值衰減這樣處理就可以啦。

    其實具體的原因也很簡單，有可能是顯色液的質(zhì)量不夠好。一般情況下，終止反應后OD值的下降前期不是很明顯。終止后，吸光度值是會隨著時間衰減，所以一般是加完終止液后立即測，這樣比較準。

    再次分析12條顯示逐級遞減的原因看看是否是：
    ① 顯色時間調(diào)整，如果您現(xiàn)在的顯色時間是10MIN，那調(diào)整到30MIN，再加終止液,觀察上述現(xiàn)象是否出現(xiàn)。

    ② 終止液中加入少量甘油看下怎么樣。
  ELISA試劑盒顯色時間是30分鐘，終止后要求在30分鐘內(nèi)檢測，加入終止液后，在加入終止液后2到3分終內(nèi)檢測，這是OD值相對比較高。擬合值能達到四個9。 

 

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