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技術(shù)文章

大公開:恒遠講解ELISA實驗的加樣原理

閱讀:1910          發(fā)布時間:2018-1-17

  ELISA是免疫學中常用檢測方法,在ELISA實驗過程中加樣也是極為重要的步驟之一。今日,上海恒遠將為廣大科研朋友講解ELISA試劑盒實驗加樣的原理,以供大家參考:

 

  正確的加樣方法應(yīng)為45度,吸頭貼著孔壁加入,應(yīng)注意角度太小,會使液體殘留在孔壁上,導致加樣不準確;吸頭應(yīng)當貼著管壁和液面的交界處!

 

  要注意避免出現(xiàn)嚴重溶血。血紅蛋白中含有血紅素基團,其有類似過氧化物的活性,因此,在以HRP為標記酶的ELISA測定中,如血清標本中血紅蛋白濃度較高,則其就很容易在溫育過程中吸附于固相,從而與后面加入的HRP底物反應(yīng)顯色。


  血清標本如是以無菌操作分離,則可以在2~8 ℃下保存一周,如為有菌操作,則建議冰凍保存。樣本的長時間保存,應(yīng)在-70 ℃以下。樣本的采集及血清分離中要注意盡量避免細菌污染,一則細菌的生長,其所分泌的一些酶可能會對抗原抗體等蛋白產(chǎn)生分解作用;二則一些細菌的內(nèi)源性酶如大腸桿菌的β-半乳糖苷酶本身會對用相應(yīng)酶作標記的測定方法產(chǎn)生非特異性干擾。標本在保存中如出現(xiàn)細菌污染所致的混濁或絮狀物時,應(yīng)離心沉淀后取上清檢測。冰凍保存的血清標本須注意避免因停電等造成的反復凍融。標本的反復凍融所產(chǎn)生的機械剪切力將對標本中的蛋白等分子產(chǎn)生破壞作用,從而引起假陰性結(jié)果。此外,凍融標本的混勻亦應(yīng)注意,不要進行劇烈振蕩,反復顛倒混勻即可。 

 

  上海恒遠是一家專業(yè)從事“產(chǎn)品研發(fā)生產(chǎn)、市場銷售、技術(shù)服務(wù)”為一體的生物技術(shù)公司,公司生產(chǎn)的產(chǎn)品質(zhì)量有保證,含量高,能夠給實驗帶來準確的結(jié)果。公司主營:Elisa試劑盒,人Elisa試劑盒,生物試劑,血清,抗體,培養(yǎng)基,標準品,國產(chǎn)血清、GIBCO胎牛血清等。種屬齊全,*。如有需要可我司銷售人員,我們將竭誠為您服務(wù)。

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