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ELISA洗板問題：開啟問答模式
閱讀：1487 發(fā)布時間：2017-5-5相信很多同學(xué)在ELISA實驗過程中都有遇到過一些棘手的問題，就在4月末，我公司接到一客戶李老師的，說希望我公司技術(shù)員幫忙指導(dǎo)一下。吳把李老師的問題向技術(shù)反應(yīng)后，我司技術(shù)員當(dāng)即打了，技術(shù)了解到李老師的問題來自于洗板。問題如下：
問題一：說明書上說洗板時要把孔里的水甩干，可我做的時候，無論我怎么拍，孔底還是有殘留液體，請問這對試驗有沒有影響？或著有沒有別的什么好的辦法可以解決這個問題？
答：有一定的影響.尤其二抗反應(yīng)后洗滌不好，會出現(xiàn)非特異.ELISA試驗中洗滌是關(guān)鍵.盡可能甩干,而且盡量少拍,不一定每次都很干,但是zui后一次洗滌要盡量干.洗滌中另一個值得注意的是盡量不要出氣泡. 如果有條件的話，可用洗板機(jī)。
問題二：什么才叫封閉好了呢?有沒有什么標(biāo)準(zhǔn)?
答：一般用1%BSA，150μl，37度，2h，如果還有非特異反應(yīng)的話，可能有其他原因，比如加樣時濺到了壁上或有氣泡，洗滌不充分，二抗?jié)舛冗^高，封閉物不合適以及反應(yīng)條件是否得當(dāng)?shù)取?/span>
問題三：1%bsa,你是用什么稀釋的,我用過pH9.6的cbs和pH7.4的pbs稀釋,結(jié)果封閉的效果都不怎么明顯,與不封閉差不多.
答：1%BSA用PBS稀釋就可以了。還有就是要注意你的操作，背景高不一定是封閉的問題。
在我公司技術(shù)員的指導(dǎo)下，李老師相繼完成了他的實驗，并且實驗效果也取得了預(yù)期的理想。李老師對我司的產(chǎn)品以及服務(wù)感到非常不錯。并表示以后有實驗還會繼續(xù)選擇我司跟我司合作。在此，我司對李老師也表示感謝，承諾將一直為客戶提供zui的試劑盒跟服務(wù)！