檢測程序：

1.  加樣：每孔各加入標準品或待測樣品 100ul ，將反應板充分混勻后置 37 ℃ 120 分鐘。

2.  洗板：用洗滌液將反應板充分洗滌 4-6 次，向濾紙上印干。

3.  每孔中加入抗體工作液10 0ul 。將反應板充分混勻后置 37 ℃ 6 0 分鐘。

4.  洗板：同前。

5.  每孔加酶標抗體工作液100ul 。將反應板置 37 ℃ 3 0 分鐘。

6.  洗板：同前。

7.  每孔加入底物工作液100ul ，置 37 ℃ 暗處反應15 分鐘。

8.  每孔加入100ul 終止液混勻。

9.  30分鐘內用酶標儀在 45 0 nm 處測 吸光值。

檢測目的：用于測定血清，血漿及相關液體等樣本。例如適合檢測包括血清、血漿、尿液、胸腹水、灌洗液、腦脊液、細胞培養(yǎng)上清、組織勻漿等標本..需要而未提供

產(chǎn)品全稱：Ⅷ-Ag 檢測試劑盒

英文名稱：FⅧ-Ag ELISA Kit

產(chǎn)品貨號：A097893

規(guī)格：48T/96T

服務：公司產(chǎn)品僅用于科研可提供免費代測服務，以及產(chǎn)品說明書和技術指導等

保存環(huán)境：2-8℃低溫、避光、防潮

主要成分：酶標板,試劑,標準品等

試劑盒組成及試劑配制 ：

樣本實驗前準備：

ELISA試劑盒液體樣本：包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細胞培養(yǎng)上清等。

（1）血清

室溫血液自然凝固10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應再次離心。

（2）血漿：

應根據(jù)標本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應再次離心。

（3）尿液：

用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實行。

（4）細胞培養(yǎng)上清：

檢測分泌性的成份時，用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。

（5）培養(yǎng)細胞

檢測細胞內的成份時，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細胞懸液，細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復凍融或加入組織蛋白萃取試劑，以使細胞破壞并放出細胞內成份。離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應再次離心。

（6）組織標本

切割標本后，稱取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆谩吮救诨笕匀槐３?-8℃的溫度。加入一定量的PBS（PH7.4），或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標本勻漿化。離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。分裝后一份待檢測，其余冷凍備用。
操作流程：

（1）待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl，每種樣品設3個平行孔；設兩個陰性對照孔，每孔加未處理組的細胞裂解液100μl；另設一個空白對照孔，加入純細胞裂解液100μl。

（2）酶標板置4℃，包被過夜。

（3）洗板：吸干孔內反應液，用洗滌液過洗一遍（將洗滌液注滿板孔后，即甩去），之后將洗滌液注滿板孔，浸泡1-2分鐘，間歇搖動。甩去孔內液體后在吸水紙上拍干。重復洗滌3-4次。

（4）陰性對照孔每孔加入PBS 50μl，樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。

（5）酶標板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內，孵育60min。

（6）洗板，同（4）。

（7）每孔加1:5000稀釋的HRP-標記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。

（8）酶標板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內，孵育60min。

（9）洗板，同（4）。

（10）每孔加TMB顯色液 100μl，輕輕混勻10s，置37℃暗處反應15-20min。

（11）每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應。

（12）分別測450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2，最終測得的OD值為兩者之差（W1-W2），以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。

（13）數(shù)據(jù)處理：在得出標本（S）和陰性對照（N）的 OD值后，計算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標準。

大鼠白介4(IL-4)檢測試劑盒咪唑溶液(1mol/L)(S)-2,6-二叔丁氧羰氨己 98%反二 99.5%

大鼠白介2(IL-2)檢測試劑盒 牛血清白蛋白溶液(1% BSA)叔丁氧羰-L-鳥氨  98%聚烯鈉 average Mw 500萬-700萬 ,80目

大鼠白介2(IL-2)檢測試劑盒 牛血清白蛋白溶液(5% BSA)BOC-D-苯氨 99%丁二 AR,99.5%

大鼠白介1α(IL-1α)檢測試劑盒 牛血清白蛋白溶液(10% BSA)N-叔丁氧羰-L-絲氨 97%丁二鈉 AR，99.0%

大鼠白介1α(IL-1α)檢測試劑盒 緩沖吸收液(100×)BOC-L-蘇氨 98.5%異辛  >99.0%(GC)

大鼠白介18(IL-18)檢測試劑盒緩沖吸收液(100×)N-苯酰-L-精氨鹽鹽 98%正壬 GCS, ≥99.5% (GC)

大鼠白介18(IL-18)檢測試劑盒EDTA洗液(10%)O-芐-L-絲氨 99%正壬 98%

大鼠白介10(IL-10)檢測試劑盒 草洗液(10%)O-叔丁-L-蘇氨 98%L-上腺 98%（劇品）

大鼠白介10(IL-10)檢測試劑盒 磷三鈉洗液(5%)N-苯酰-L-酪氨 98%L-去上腺 98%

大鼠胰島樣生長因子2(IGF-2)檢測試劑盒尿洗液(45%)N-(叔丁氧羰)乙 96%定側鏈 98%

大鼠胰島樣生長因子2(IGF-2)檢測試劑盒碳鈉洗液(10%)卡特縮合劑 98% 5-芐硫四氮唑 98.5%

大鼠胰島樣生長因子1(IGF-1)檢測試劑盒碳鈉洗液(10%)舒緩激肽三醋鹽  95%5-巰-1-四唑 98%

大鼠胰島樣生長因子1(IGF-1)檢測試劑盒碳鈉洗液(10%)BOC-L-氨 98%氧鹽鹽 98%

大鼠γ干擾(IFN-γ)檢測試劑盒丁鈉溶液(5mol/L)BOC-L-絲氨 97%疊氮鈉 AR,99%（劇品）

大鼠γ干擾(IFN-γ)檢測試劑盒肝鈉溶液(0.1%,12.5KU,無菌)S-芐-L-半胱氨 98%四氮唑乙 98%

大鼠間粘附分子1(ICAM-1/CD54)檢測試劑盒 肝鈉溶液(0.1%,12.5KU,無菌)Boc-L-天冬氨 4-芐酯  98%油 AR
Ⅷ-Ag 檢測試劑盒2,4-二氨苯(分析標準品,>99%)EGR1結合蛋白2抗體鈉

3,3'-二甲氧基聯(lián)苯(標準品)硝基化α-突觸核蛋白鈉

2，4-二氯酚標準溶液(1.00mg/ml,基體：甲)NK2轉錄樣蛋白B抗體鈉

2,6-二氯(標準品)神經(jīng)正五聚體1抗體素鹽鹽

2,3-二甲(標準品)核孔蛋白NUP160抗體素鹽鹽

2,5-二甲酚標準溶液(分析標準品,>99.8%)核分離基因C蛋白抗體硫鹽

2,6-二叔丁基對甲酚(BHT)(分析標準品,>99.7%(GC))磷化核分離基因C蛋白抗體硫鹽