檢測(cè)目的：用于測(cè)定血清，血漿及相關(guān)液體等樣本。例如適合檢測(cè)包括血清、血漿、尿液、胸腹水、灌洗液、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清、組織勻漿等標(biāo)本..需要而未提供

產(chǎn)品全稱：T-TM 檢測(cè)試劑盒

英文名稱：T-TM ELISA Kit

產(chǎn)品貨號(hào)：A097904

規(guī)格：48T/96T

服務(wù)：公司產(chǎn)品僅用于科研可提供免費(fèi)代測(cè)服務(wù)，以及產(chǎn)品說明書和技術(shù)指導(dǎo)等

保存環(huán)境：2-8℃低溫、避光、防潮

主要成分：酶標(biāo)板,試劑,標(biāo)準(zhǔn)品等

試劑盒組成及試劑配制 ：

檢測(cè)程序：

1.  加樣：每孔各加入標(biāo)準(zhǔn)品或待測(cè)樣品 100ul ，將反應(yīng)板充分混勻后置 37 ℃ 120 分鐘。

2.  洗板：用洗滌液將反應(yīng)板充分洗滌 4-6 次，向?yàn)V紙上印干。

3.  每孔中加入抗體工作液10 0ul 。將反應(yīng)板充分混勻后置 37 ℃ 6 0 分鐘。

4.  洗板：同前。

5.  每孔加酶標(biāo)抗體工作液100ul 。將反應(yīng)板置 37 ℃ 3 0 分鐘。

6.  洗板：同前。

7.  每孔加入底物工作液100ul ，置 37   ℃ 暗處反應(yīng)15 分鐘。

8.  每孔加入100ul 終止液混勻。

9.  30分鐘內(nèi)用酶標(biāo)儀在 45 0 nm 處測(cè) 吸光值。

樣本實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備：

ELISA試劑盒液體樣本：包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清等。

（1）血清

室溫血液自然凝固10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。

（2）血漿：

應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。

（3）尿液：

用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實(shí)行。

（4）細(xì)胞培養(yǎng)上清：

檢測(cè)分泌性的成份時(shí)，用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。

（5）培養(yǎng)細(xì)胞

檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí)，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細(xì)胞懸液，細(xì)胞濃度達(dá)到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃取試劑，以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。

（6）組織標(biāo)本

切割標(biāo)本后，稱取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS（PH7.4），或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿化。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測(cè)，其余冷凍備用。

兔纖溶抗纖溶復(fù)合物(PAP)檢測(cè)試劑盒 血清鎂檢測(cè)試劑盒(Calmagite比色法)N-芐氧羰-L-苯氨 98%5-溴-4-3吲哚β-D 半乳糖 99%

兔纖溶抑制因子/激活的纖溶抑制物(TAFI)檢測(cè)試劑盒血清鎂檢測(cè)試劑盒(Calmagite比色法)L-瓜氨 98%L-(?)-木糖 99%

兔纖溶抑制因子/激活的纖溶抑制物(TAFI)檢測(cè)試劑盒血清銅檢測(cè)試劑盒(Cuprizone微板法)6--1-羥苯并三氮唑 98%烯 AR,>99%(GC)，包含180-200 ppm MEHQ 穩(wěn)定劑

兔子白介2(IL-2)檢測(cè)試劑盒血清銅檢測(cè)試劑盒(Cuprizone比色法)2--N-琥珀酰亞碳酯 98%烯烯酯, 包含50-185 ppm MEHQ穩(wěn)定劑, 98%

兔子白介2(IL-2)檢測(cè)試劑盒血清銅檢測(cè)試劑盒(Cuprizone比色法)D-半胱氨鹽鹽一水物 98%烯芐酯 98%

兔血漿α顆粒膜蛋白(GMP-140)檢測(cè)試劑盒血清鋅檢測(cè)試劑盒(吡啶偶氮微板法)化聚苯乙烯樹脂 1%DVB交聯(lián)  1.0~1.24mmol/g , 100~200 mes二烯1,3-丁二酯, 含200 ppm MEHQ穩(wěn)定劑, 95%

兔血漿α顆粒膜蛋白(GMP-140)檢測(cè)試劑盒血清鋅檢測(cè)試劑盒(吡啶偶氮比色法)N-芐氧羰-L-精氨 98.5%二烯1,4-丁二酯, 含100ppm MEHQ 穩(wěn)定劑, 95%

兔一氧化氮(NO)檢測(cè)試劑盒血清鋅檢測(cè)試劑盒(吡啶偶氮比色法)N-芐氧羰-L-谷氨 98%二烯1,3-丁二酯, 含500 ppm 對(duì)苯二（HQ）穩(wěn)定劑, 98%

兔一氧化氮(NO)檢測(cè)試劑盒總紅(TBIL)檢測(cè)試劑盒(改良Jendrassik-Grof微板法)2-溴芐-N-琥珀酰亞碳酯 99%烯叔丁酯, 包含有200 ppm MEHQ阻聚劑, 99%

兔補(bǔ)體蛋白3(C3)檢測(cè)試劑盒總紅(TBIL)檢測(cè)試劑盒(改良Jendrassik-Grof比色法)FMOC-Β-環(huán)己-L-氨 98%烯丁酯 GR,99%

兔補(bǔ)體蛋白3(C3)檢測(cè)試劑盒總紅(TBIL)檢測(cè)試劑盒(改良Jendrassik-Grof比色法)L-環(huán)己甘氨 98%烯叔丁酯 99%,含10-20 ppm MEHQ 作為穩(wěn)定劑

兔p物質(zhì)(SP)檢測(cè)試劑盒總紅(TBIL)檢測(cè)試劑盒(釩微板法)L-3-苯氨 98%烯環(huán)己酯, 包含60 - 100 ppm MEHQ（單）穩(wěn)定劑,

兔p物質(zhì)(SP)檢測(cè)試劑盒總紅(TBIL)檢測(cè)試劑盒(釩比色法)Boc-D-4-苯氨 98%二烯二乙二酯 96%

兔子層連蛋白/板層(LN)檢測(cè)試劑盒總紅(TBIL)檢測(cè)試劑盒(釩比色法)Boc-N'-(2-芐氧羰)-D-賴氨 98%烯二乙氨, 包含100 ppm 吩噻, 99%

兔子層連蛋白/板層(LN)檢測(cè)試劑盒總紅(TBIL)檢測(cè)試劑盒(BOD微板法)Fmoc-S-(4-芐)-L-半胱氨  99%烯乙氧乙氧, >90%(GC),含1000ppmMEHQ穩(wěn)定劑

兔環(huán)磷腺(cAMP)檢測(cè)試劑盒總紅(TBIL)檢測(cè)試劑盒(BOD比色法)N-芐氧羰-D-谷氨 98%二烯二乙二酯 75%
T-TM 檢測(cè)試劑盒1,2,3-三氯苯(分析標(biāo)準(zhǔn)品,>99.8%（GC))N-乙?；D(zhuǎn)移2抗體

1,2,4,5-四氯苯標(biāo)準(zhǔn)溶液(0.104mg/ml,基體:異辛烷)富含亮氨重復(fù)結(jié)構(gòu)域蛋白2抗體

標(biāo)準(zhǔn)溶液(202mg/L,基體:甲)孤兒核受體TAK1抗體

標(biāo)準(zhǔn)溶液(100μg/ml,u=4%)骨巢蛋白抗體磺甲基嘧啶

標(biāo)準(zhǔn)溶液(10μg/ml,u=7%)軸突生長(zhǎng)誘向因子5抗體磺甲基嘧啶

三唑磷(分析標(biāo)準(zhǔn)品,>97%(HPLC))磷化p-IκB-α抗體磺二甲基嘧啶

三唑磷(分析標(biāo)準(zhǔn)品,>97%(HPLC))G21蛋白質(zhì)抗體磺二甲基

操作流程：

（1）待測(cè)樣品孔中每孔加入待測(cè)樣品100μl，每種樣品設(shè)3個(gè)平行孔；設(shè)兩個(gè)陰性對(duì)照孔，每孔加未處理組的細(xì)胞裂解液100μl；另設(shè)一個(gè)空白對(duì)照孔，加入純細(xì)胞裂解液100μl。

（2）酶標(biāo)板置4℃，包被過夜。

（3）洗板：吸干孔內(nèi)反應(yīng)液，用洗滌液過洗一遍（將洗滌液注滿板孔后，即甩去），之后將洗滌液注滿板孔，浸泡1-2分鐘，間歇搖動(dòng)。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復(fù)洗滌3-4次。

（4）陰性對(duì)照孔每孔加入PBS 50μl，樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。

（5）酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi)，孵育60min。

（6）洗板，同（4）。

（7）每孔加1:5000稀釋的HRP-標(biāo)記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。

（8）酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi)，孵育60min。

（9）洗板，同（4）。

（10）每孔加TMB顯色液 100μl，輕輕混勻10s，置37℃暗處反應(yīng)15-20min。

（11）每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應(yīng)。

（12）分別測(cè)450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2，最終測(cè)得的OD值為兩者之差（W1-W2），以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。

（13）數(shù)據(jù)處理：在得出標(biāo)本（S）和陰性對(duì)照（N）的 OD值后，計(jì)算S/N值。S/N≥2.1為陽(yáng)性判定標(biāo)準(zhǔn)。