檢測目的：用于測定血清，血漿及相關(guān)液體等樣本。例如適合檢測包括血清、血漿、尿液、胸腹水、灌洗液、腦脊液、細胞培養(yǎng)上清、組織勻漿等標本..需要而未提供

產(chǎn)品全稱：AIF 進口檢測試劑盒

英文名稱：AIF ELISA kit

產(chǎn)品貨號：A097533

規(guī)格：48T/96T

服務：公司產(chǎn)品僅用于科研可提供免費代測服務，以及產(chǎn)品說明書和技術(shù)指導等

保存環(huán)境：2-8℃低溫、避光、防潮

主要成分：酶標板,試劑,標準品等

試劑盒組成及試劑配制 ：

檢測程序：

1.  加樣：每孔各加入標準品或待測樣品 100ul ，將反應板充分混勻后置 37 ℃ 120 分鐘。

2.  洗板：用洗滌液將反應板充分洗滌 4-6 次，向濾紙上印干。

3.  每孔中加入抗體工作液10 0ul 。將反應板充分混勻后置 37 ℃ 6 0 分鐘。

4.  洗板：同前。

5.  每孔加酶標抗體工作液100ul 。將反應板置 37 ℃ 3 0 分鐘。

6.  洗板：同前。

7.  每孔加入底物工作液100ul ，置 37   ℃ 暗處反應15 分鐘。

8.  每孔加入100ul 終止液混勻。

9.  30分鐘內(nèi)用酶標儀在 45 0 nm 處測 吸光值。

樣本實驗前準備：

ELISA試劑盒液體樣本：包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細胞培養(yǎng)上清等。

（1）血清

室溫血液自然凝固10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應再次離心。

（2）血漿：

應根據(jù)標本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應再次離心。

（3）尿液：

用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實行。

（4）細胞培養(yǎng)上清：

檢測分泌性的成份時，用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細收集上清。

（5）培養(yǎng)細胞

檢測細胞內(nèi)的成份時，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細胞懸液，細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復凍融或加入組織蛋白萃取試劑，以使細胞破壞并放出細胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應再次離心。

（6）組織標本

切割標本后，稱取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。標本融化后仍然保?-8℃的溫度。加入一定量的PBS（PH7.4），或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標本勻漿化。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細收集上清。分裝后一份待檢測，其余冷凍備用。

異常漢遜酵母兔子膽固酯轉(zhuǎn)移蛋白(CETP)ELISA Kit，48T/96T 小鼠可溶性CD40配體(sCD40L)

橘青人內(nèi)皮型一氧化氮合成3(eNOS-3)ELISA Kit，48T/96T 小鼠抵御素(Rsistin)

林業(yè)微菌種小鼠內(nèi)皮型一氧化氮合成3(eNOS-3)ELISA Kit，48T/96T 小鼠調(diào)節(jié)活化蛋白(Rantes)

澳大利亞平臍蠕孢豬內(nèi)皮型一氧化氮合成3(eNOS-3)ELISA Kit，48T/96T 小鼠P-Selectin

簇生黃韌傘大鼠內(nèi)皮型一氧化氮合成3(eNOS-3)ELISA Kit，48T/96T 小鼠Peiotrophin

黃綠口蘑兔子內(nèi)皮型一氧化氮合成3(eNOS-3)ELISA Kit，48T/96T 小鼠血小板源性生長因子(PDGF-AB)

長根小德蘑牛α1性糖蛋白(α1-AGP)ELISA Kit，48T/96T 小鼠血小板源性生長因子可溶性受體α ( PDGF sRα)

雙孢蘑菇人α1性糖蛋白(α1-AGP)ELISA Kit，48T/96T 小鼠抑瘤素M(OSM)

肉色迷孔菌小鼠α1性糖蛋白(α1-AGP)ELISA Kit，48T/96T 小鼠OPN

湯姆青大鼠α1性糖蛋白(α1-AGP)ELISA Kit，48T/96T 小鼠骨保護素(OPG)

粉粒紅濕傘牛結(jié)合珠蛋白/觸珠蛋白(Hpt/HP)ELISA Kit，48T/96T 小鼠神經(jīng)營養(yǎng)因子-4(NT-4)

簇生離褶傘人結(jié)合珠蛋白/觸珠蛋白(Hpt/HP)ELISA Kit，48T/96T 小鼠神經(jīng)營養(yǎng)因子-3(NT-3)

侵染鏈格孢小鼠結(jié)合珠蛋白/觸珠蛋白(Hpt/HP)ELISA Kit，48T/96T 小鼠神經(jīng)生長因子(NGF)

竹針孢座囊菌大鼠結(jié)合珠蛋白/觸珠蛋白(Hpt/HP)ELISA Kit，48T/96T 小鼠基質(zhì)金屬蛋白3(MMP-3)

棒狀桿菌屬人內(nèi)素(ET)ELISA Kit，48T/96T 小鼠基質(zhì)金屬蛋白2(MMP-2)
AIF 進口檢測試劑盒5'-三磷胞三鈉鹽核結(jié)合蛋白9抗體苯溶液(PMSF,100mmol/L)

松弛素A(>98%，BR)GEM相互作用蛋白抗體苯溶液(PMSF,100mmol/L)

松弛素C(>98%，BR)肽硫轉(zhuǎn)移C段結(jié)構(gòu)域抗體蛋白抑制劑混合液(100×PIC)

松弛素 D(>98%，BR)糖基轉(zhuǎn)移樣1抗體乙酰(10mg/ml)

松弛素E(>98%，BR)促進成骨分化因子抗體焦亞硫鈉溶液(100×)

D-樟腦(>99%,BR)甘油磷二酯磷結(jié)構(gòu)域3抗體亮抑肽溶液(lepueptin,1mg/ml)

D(+)-二苯甲酰一水(>

操作流程：

（1）待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl，每種樣品設3個平行孔；設兩個陰性對照孔，每孔加未處理組的細胞裂解液100μl；另設一個空白對照孔，加入純細胞裂解液100μl。

（2）酶標板置4℃，包被過夜。

（3）洗板：吸干孔內(nèi)反應液，用洗滌液過洗一遍（將洗滌液注滿板孔后，即甩去），之后將洗滌液注滿板孔，浸泡1-2分鐘，間歇搖動。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復洗滌3-4次。

（4）陰性對照孔每孔加入PBS 50μl，樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。

（5）酶標板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi)，孵育60min。

（6）洗板，同（4）。

（7）每孔加1:5000稀釋的HRP-標記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。

（8）酶標板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi)，孵育60min。

（9）洗板，同（4）。

（10）每孔加TMB顯色液 100μl，輕輕混勻10s，置37℃暗處反應15-20min。

（11）每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應。

（12）分別測450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2，最終測得的OD值為兩者之差（W1-W2），以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。

（13）數(shù)據(jù)處理：在得出標本（S）和陰性對照（N）的 OD值后，計算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標準。