檢測(cè)目的：用于測(cè)定血清，血漿及相關(guān)液體等樣本。例如適合檢測(cè)包括血清、血漿、尿液、胸腹水、灌洗液、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清、組織勻漿等標(biāo)本..需要而未提供

產(chǎn)品全稱(chēng)：EPCA2 進(jìn)口檢測(cè)試劑盒

英文名稱(chēng)：EPCA2 ELISA kit

產(chǎn)品貨號(hào)：A096907

規(guī)格：48T/96T

服務(wù)：公司產(chǎn)品僅用于科研可提供免費(fèi)代測(cè)服務(wù)，以及產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)和技術(shù)指導(dǎo)等

保存環(huán)境：2-8℃低溫、避光、防潮

主要成分：酶標(biāo)板,試劑,標(biāo)準(zhǔn)品等

試劑盒組成及試劑配制 ：

檢測(cè)程序：

1.  加樣：每孔各加入標(biāo)準(zhǔn)品或待測(cè)樣品 100ul ，將反應(yīng)板充分混勻后置 37 ℃ 120 分鐘。

2.  洗板：用洗滌液將反應(yīng)板充分洗滌 4-6 次，向?yàn)V紙上印干。

3.  每孔中加入抗體工作液10 0ul 。將反應(yīng)板充分混勻后置 37 ℃ 6 0 分鐘。

4.  洗板：同前。

5.  每孔加酶標(biāo)抗體工作液100ul 。將反應(yīng)板置 37 ℃ 3 0 分鐘。

6.  洗板：同前。

7.  每孔加入底物工作液100ul ，置 37   ℃ 暗處反應(yīng)15 分鐘。

8.  每孔加入100ul 終止液混勻。

9.  30分鐘內(nèi)用酶標(biāo)儀在 45 0 nm 處測(cè) 吸光值。

樣本實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備：

ELISA試劑盒液體樣本：包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清等。

（1）血清

室溫血液自然凝固10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。

（2）血漿：

應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。

（3）尿液：

用無(wú)菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實(shí)行。

（4）細(xì)胞培養(yǎng)上清：

檢測(cè)分泌性的成份時(shí)，用無(wú)菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。

（5）培養(yǎng)細(xì)胞

檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí)，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細(xì)胞懸液，細(xì)胞濃度達(dá)到100萬(wàn)/ml左右。通過(guò)反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃取試劑，以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。

（6）組織標(biāo)本

切割標(biāo)本后，稱(chēng)取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆谩?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS（PH7.4），或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿化。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測(cè)，其余冷凍備用。

冰凍切片組織CASPASE-3蛋白表達(dá)NBT顯色光學(xué)顯微鏡檢測(cè)試劑盒10/20次人前脂肪-皮下cDNA豚鼠內(nèi)皮型一氧化氮合成（eNOS）ELISA試劑盒,

石蠟切片組織CASPASE-3蛋白表達(dá)NBT顯色光學(xué)顯微鏡檢測(cè)試劑盒10/20次人間充質(zhì)干(骨髓)cDNA雞腫瘤壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體3（TRAIL-R3）ELISA試劑盒,

細(xì)胞CASPASE-3蛋白表達(dá)比色法定量檢測(cè)試劑盒10/50 次人間充質(zhì)干(脂肪)cDNA現(xiàn)隱肉湯

細(xì)胞CASPASE-3蛋白表達(dá)熒光定量檢測(cè)試劑盒10/50 次人間充質(zhì)干(肝臟)cDNA萘啶酮添加于225ml HB4160中制成LB1

CASPASE-3蛋白表達(dá)西方雜交分析試劑盒5次人臍帶間充質(zhì)干cDNA3,5-二-L-酪氨

CASPASE-3蛋白免疫共沉淀分析試劑盒5次人肺間充質(zhì)干cDNABOC-D-高苯

CASPASE-3蛋白表達(dá)elisa試劑盒25次上皮cDNABOC-L-羥脯氨

細(xì)胞CASPASE-4蛋白表達(dá)流式細(xì)胞儀檢測(cè)試劑盒10/20次成纖維cDNA丹參素鈉 Sodium Danshensu

載玻片細(xì)胞CASPASE-4蛋白表達(dá)熒光顯微鏡檢測(cè)試劑盒10/20次人臍靜脈內(nèi)皮cDNA黃芩 Baicalin

冰凍切片組織CASPASE-4蛋白表達(dá)熒光顯微鏡檢測(cè)試劑盒10/20次人臍動(dòng)脈內(nèi)皮cDNA5-AMP瓊脂糖凝膠4B

石蠟切片組織CASPASE-4蛋白表達(dá)熒光顯微鏡檢測(cè)試劑盒10/20次人臍靜脈平滑肌cDNA人橋粒芯糖蛋白-1（DGS-E1）ELISA試劑盒, DGS-E1 ELISA kit

載玻片細(xì)胞CASPASE-4蛋白表達(dá)NBT顯色光學(xué)顯微鏡檢測(cè)試劑盒10/20次人臍動(dòng)脈平滑肌cDNA人甲狀腺非肽激素抗體（THAA）ELISA試劑盒, THAA ELISA kit

冰凍切片組織CASPASE-4蛋白表達(dá)NBT顯色光學(xué)顯微鏡檢測(cè)試劑盒10/20次人腦微血管內(nèi)皮總RNA人抗角蛋白絲聚集素/絲集蛋白抗體（AFA）ELISA試劑盒,AFA ELISA

石蠟切片組織CASPASE-4蛋白表達(dá)NBT顯色光學(xué)顯微鏡檢測(cè)試劑盒10/20次人腦血管平滑肌總RNA人肌生成素（MYOG）ELISA試劑盒,

細(xì)胞CASPASE-4蛋白表達(dá)比色法定量檢測(cè)試劑盒10/50 次人腦血管周總RNA人延伸蛋白A（EloA）ELISA試劑盒,
EPCA2 進(jìn)口檢測(cè)試劑盒堿肌側(cè)索硬化癥相關(guān)蛋白1抗體馬兜鈴C

堿（標(biāo)準(zhǔn)品）β淀粉樣前體蛋白結(jié)合蛋白2抗體（X11β）馬兜鈴?fù)?/span>

馬來(lái)乙酰結(jié)合蛋白抗體馬來(lái)

馬來(lái)磷化分裂周期蛋白16抗體馬錢(qián)

馬來(lái)白血病相關(guān)蛋白AHI1抗體馬錢(qián)

馬來(lái)（標(biāo)準(zhǔn)品）活化誘導(dǎo)胞嘧啶核脫氨抗體買(mǎi)麻藤

降鈣素；醋三磷腺結(jié)合盒轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白9抗體麥冬元-3-O-α-L-吡喃鼠李糖基（1→2）-β-D-吡喃葡萄糖

降鈣素；醋ADP核糖基化因子3抗體麥冬甲基黃烷酮A

操作流程：

（1）待測(cè)樣品孔中每孔加入待測(cè)樣品100μl，每種樣品設(shè)3個(gè)平行孔；設(shè)兩個(gè)陰性對(duì)照孔，每孔加未處理組的細(xì)胞裂解液100μl；另設(shè)一個(gè)空白對(duì)照孔，加入純細(xì)胞裂解液100μl。

（2）酶標(biāo)板置4℃，包被過(guò)夜。

（3）洗板：吸干孔內(nèi)反應(yīng)液，用洗滌液過(guò)洗一遍（將洗滌液注滿板孔后，即甩去），之后將洗滌液注滿板孔，浸泡1-2分鐘，間歇搖動(dòng)。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復(fù)洗滌3-4次。

（4）陰性對(duì)照孔每孔加入PBS 50μl，樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。

（5）酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi)，孵育60min。

（6）洗板，同（4）。

（7）每孔加1:5000稀釋的HRP-標(biāo)記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。

（8）酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi)，孵育60min。

（9）洗板，同（4）。

（10）每孔加TMB顯色液 100μl，輕輕混勻10s，置37℃暗處反應(yīng)15-20min。

（11）每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應(yīng)。

（12）分別測(cè)450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2，最終測(cè)得的OD值為兩者之差（W1-W2），以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。

（13）數(shù)據(jù)處理：在得出標(biāo)本（S）和陰性對(duì)照（N）的 OD值后，計(jì)算S/N值。S/N≥2.1為陽(yáng)性判定標(biāo)準(zhǔn)。