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貨號 | A098042 |
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產品全稱:PF-Ab 檢測試劑盒
英文名稱:PF-Ab ELISA Kit
產品貨號:A098042
規(guī)格:48T/96T
服務:公司產品僅用于科研可提供免費代測服務,以及產品說明書和技術指導等
保存環(huán)境:2-8℃低溫、避光、防潮
主要成分:酶標板,試劑,標準品等
檢測目的:用于測定血清,血漿及相關液體等樣本。例如適合檢測包括血清、血漿、尿液、胸腹水、灌洗液、腦脊液、細胞培養(yǎng)上清、組織勻漿等標本..需要而未提供
試劑盒組成及試劑配制 :
1. 酶聯(lián)板(Assay plate ):一塊(96孔)。 2. 標準品(Standard):2瓶(凍干品)。 3. 樣品稀釋液(Sample Diluent):1×20ml/瓶。 4. 標記抗體稀釋液(Biotin-antibody Diluent):1×10ml/瓶。 5. 辣根過氧化物酶標記親和素稀釋液 (HRP-avidin Diluent):1×10ml/瓶。 6. 標記抗體(Biotin-antibody):1×120μl/瓶(1:100) 7. 辣根過氧化物酶標記親和素(HRP-avidin):1×120μl/瓶(1:100) 8. 底物溶液(TMB Substrate):1×10ml/瓶。 9. 濃洗滌液(Wash Buffer):1×20ml/瓶,使用時每瓶用蒸餾水稀釋25倍。 10. 終止液(Stop Solution):1×10ml/瓶(2N H2SO4)。 |
樣本實驗前準備:
ELISA試劑盒液體樣本:包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細胞培養(yǎng)上清等。
(1)血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
(2)血漿:
應根據(jù)標本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
(3)尿液:
用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實行。
(4)細胞培養(yǎng)上清:
檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。
(5)培養(yǎng)細胞
檢測細胞內的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細胞破壞并放出細胞內成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
(6)組織標本
切割標本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆谩吮救诨笕匀槐3?-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
操作流程:
(1)待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl,每種樣品設3個平行孔;設兩個陰性對照孔,每孔加未處理組的細胞裂解液100μl;另設一個空白對照孔,加入純細胞裂解液100μl。
(2)酶標板置4℃,包被過夜。
(3)洗板:吸干孔內反應液,用洗滌液過洗一遍(將洗滌液注滿板孔后,即甩去),之后將洗滌液注滿板孔,浸泡1-2分鐘,間歇搖動。甩去孔內液體后在吸水紙上拍干。重復洗滌3-4次。
(4)陰性對照孔每孔加入PBS 50μl,樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。
(5)酶標板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內,孵育60min。
(6)洗板,同(4)。
(7)每孔加1:5000稀釋的HRP-標記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。
(8)酶標板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內,孵育60min。
(9)洗板,同(4)。
(10)每孔加TMB顯色液 100μl,輕輕混勻10s,置37℃暗處反應15-20min。
(11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應。
(12)分別測450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,最終測得的OD值為兩者之差(W1-W2),以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
(13)數(shù)據(jù)處理:在得出標本(S)和陰性對照(N)的 OD值后,計算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標準。
檢測程序:
1. 加樣:每孔各加入標準品或待測樣品 100ul ,將反應板充分混勻后置 37 ℃ 120 分鐘。
2. 洗板:用洗滌液將反應板充分洗滌 4-6 次,向濾紙上印干。
3. 每孔中加入抗體工作液10 0ul 。將反應板充分混勻后置 37 ℃ 6 0 分鐘。
4. 洗板:同前。
5. 每孔加酶標抗體工作液100ul 。將反應板置 37 ℃ 3 0 分鐘。
6. 洗板:同前。
7. 每孔加入底物工作液100ul ,置 37 ℃ 暗處反應15 分鐘。
8. 每孔加入100ul 終止液混勻。
9. 30分鐘內用酶標儀在 45 0 nm 處測 吸光值。
β2糖蛋白1抗體IgM(β2-GP1 Ab IgM)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒N-氨乙-3-氨二氧硅烷六氟磷 99%氟 49.5-50.5%溶液
原鈣黏γA2(PCDHγA2)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 聚季銨鹽-10 98%L-氨酰-L-谷酰 98%
半乳糖β(GLβ)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒聚季銨鹽-10間苯三,二水 99%N-代琥珀酰亞 98%
甘露糖α1A類成員1(MAN1A1)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 3-異酯三氧硅烷吡咯烷 99%肌,一水 BR
β-促脂(β-LPH)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 3-異酯三氧硅烷三正 CP,98.0%無水肌 98%
β淀粉樣前體蛋白(βAPP)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒三羥氨烷三辛 90%肌酐 99%
防御β1(DEFB1)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒三羥氨烷三正丁 CP,98% N,N-二甘氨鹽鹽 99%
防御β2(DEFβ2/DEFB2)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒三羥氨烷三苯 99%三 AR,99.5%
β甘露糖(β Manase)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 雙[三(羥)氨烷]三羥烷三烯酯 80%N-月桂酰肌氨鈉 98%
β肌動蛋白(β-actin)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 雙[三(羥)氨烷]1,3,5-三氧苯 98%萘唑啉鹽鹽 99%
半胱氨酰白三烯受體1(CYSLTR1)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 雙[三(羥)氨烷]三烯 97%鈀標準溶液 1000μg/ml,溶劑:2.0 mol/L HCl
內酰β(LACTβ)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 雙[三(羥)氨烷]原碳四 97%鈀標準溶液 100μg/ml
β葡糖(β-Glu)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 雙[三(羥)氨烷]2-硫代 98%化鋇溶液 1mol/L(2N)
白介1受體關聯(lián)激3 (IRAK3)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒雙[三(羥)氨烷]N,O-雙(三硅烷)乙酰 95%溴標準溶液 0.05000mol/L(0.1N)
β葡萄糖(GUSβ)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 三羥氨烷鹽鹽三聚乙 >98.0%(GC)硫鈰標準溶液 0.1000mol/L90.1N
Syncollin蛋白(SYCN)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒三羥氨烷鹽鹽吲哚 standard for GC,>99.5%(GC)銅標準溶液 1000μg/ml
PF-Ab 檢測試劑盒鄰苯二甲二乙酯(>98.0%(GC))磷化蛋白激C mu型抗體
鄰苯二甲二乙酯(>98.0%(GC))前纖維蛋白1抗體絡合指示劑
鄰苯二甲雙(2-乙基己基)酯(>98.0%(GC))增殖核抗原抗體絡合指示劑
鄰苯二甲雙(2-乙基己基)酯(>98.0%(GC))磷化粘著斑激抗體
鄰苯二甲二酯(>98.0%(GC))磷化粘著斑激抗體羅丹明123
鄰苯二甲二酯(>98.0%(GC))磷化p21激活激1抗體羅丹明123
鄰苯二甲二己酯(>98.0%(GC))磷化3磷肌依賴性蛋白激1抗體羅丹明B
鄰苯二甲二己酯(>
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