產(chǎn)品全稱：PK 進(jìn)口檢測(cè)試劑盒

英文名稱：PK ELISA Kit

產(chǎn)品貨號(hào)：A097021

規(guī)格：48T/96T

服務(wù)：公司產(chǎn)品僅用于科研可提供免費(fèi)代測(cè)服務(wù)，以及產(chǎn)品說(shuō)明書和技術(shù)指導(dǎo)等

保存環(huán)境：2-8℃低溫、避光、防潮

主要成分：酶標(biāo)板,試劑,標(biāo)準(zhǔn)品等

檢測(cè)目的：用于測(cè)定血清，血漿及相關(guān)液體等樣本。例如適合檢測(cè)包括血清、血漿、尿液、胸腹水、灌洗液、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清、組織勻漿等標(biāo)本..需要而未提供

試劑盒組成及試劑配制 ：

樣本實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備：

ELISA試劑盒液體樣本：包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清等。

（1）血清

室溫血液自然凝固10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。

（2）血漿：

應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。

（3）尿液：

用無(wú)菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實(shí)行。

（4）細(xì)胞培養(yǎng)上清：

檢測(cè)分泌性的成份時(shí)，用無(wú)菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。

（5）培養(yǎng)細(xì)胞

檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí)，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細(xì)胞懸液，細(xì)胞濃度達(dá)到100萬(wàn)/ml左右。通過(guò)反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃取試劑，以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。

（6）組織標(biāo)本

切割標(biāo)本后，稱取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS（PH7.4），或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿化。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測(cè)，其余冷凍備用。
操作流程：

（1）待測(cè)樣品孔中每孔加入待測(cè)樣品100μl，每種樣品設(shè)3個(gè)平行孔；設(shè)兩個(gè)陰性對(duì)照孔，每孔加未處理組的細(xì)胞裂解液100μl；另設(shè)一個(gè)空白對(duì)照孔，加入純細(xì)胞裂解液100μl。

（2）酶標(biāo)板置4℃，包被過(guò)夜。

（3）洗板：吸干孔內(nèi)反應(yīng)液，用洗滌液過(guò)洗一遍（將洗滌液注滿板孔后，即甩去），之后將洗滌液注滿板孔，浸泡1-2分鐘，間歇搖動(dòng)。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復(fù)洗滌3-4次。

（4）陰性對(duì)照孔每孔加入PBS 50μl，樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。

（5）酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi)，孵育60min。

（6）洗板，同（4）。

（7）每孔加1:5000稀釋的HRP-標(biāo)記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。

（8）酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi)，孵育60min。

（9）洗板，同（4）。

（10）每孔加TMB顯色液 100μl，輕輕混勻10s，置37℃暗處反應(yīng)15-20min。

（11）每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應(yīng)。

（12）分別測(cè)450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2，最終測(cè)得的OD值為兩者之差（W1-W2），以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。

（13）數(shù)據(jù)處理：在得出標(biāo)本（S）和陰性對(duì)照（N）的 OD值后，計(jì)算S/N值。S/N≥2.1為陽(yáng)性判定標(biāo)準(zhǔn)。

檢測(cè)程序：

1.  加樣：每孔各加入標(biāo)準(zhǔn)品或待測(cè)樣品 100ul ，將反應(yīng)板充分混勻后置 37 ℃ 120 分鐘。

2.  洗板：用洗滌液將反應(yīng)板充分洗滌 4-6 次，向?yàn)V紙上印干。

3.  每孔中加入抗體工作液10 0ul 。將反應(yīng)板充分混勻后置 37 ℃ 6 0 分鐘。

4.  洗板：同前。

5.  每孔加酶標(biāo)抗體工作液100ul 。將反應(yīng)板置 37 ℃ 3 0 分鐘。

6.  洗板：同前。

7.  每孔加入底物工作液100ul ，置 37 ℃ 暗處反應(yīng)15 分鐘。

8.  每孔加入100ul 終止液混勻。

9.  30分鐘內(nèi)用酶標(biāo)儀在 45 0 nm 處測(cè) 吸光值。

GSK-3 Beta（抗人；抗兔；抗小鼠；抗大鼠）100微克Standard 11 nutrient agar標(biāo)準(zhǔn)11營(yíng)養(yǎng)瓊脂人抑肽（AP）ELISA試劑盒,

PI-3 Kinase p110 beta（抗人；抗兔；抗小鼠；抗大鼠）100微克Staphylococcus enrichment broth( base)acc.to BAIRD葡萄狀球菌富集肉湯（基礎(chǔ)）人單氧化（MAO）ELISA試劑盒,

PP2A（抗人；抗兔；抗小鼠；抗大鼠）100微克TB medium acc.to LOENSTIN-JENSEN( base) TB培養(yǎng)基（基礎(chǔ)）人葡萄糖氧化（GOD）ELISA試劑盒,

IKB-α（抗人；抗兔；抗小鼠；抗大鼠）100微克TCBS agar Vibrio selective agar TCBS瓊脂/弧菌選擇瓊脂人原Ⅱ（Try-Ⅱ）ELISA試劑盒,

JNK/SAPK（抗人；抗兔；抗小鼠；抗大鼠）100微克Test agar fo the residue test acc.to KUNDRAT測(cè)試瓊脂（殘余測(cè)試）人膜表面免疫球蛋白（SmIg）ELISA試劑盒,

MAP1b（MAP5）（抗人；抗兔；抗小鼠；抗大鼠）100微克Agar test PH6.0 for the inhibitor test測(cè)試瓊脂PH6.0（抑制劑測(cè)試）人過(guò)敏素/補(bǔ)體片斷4（C4a）ELISA試劑盒,

TUBULIN（抗人；抗兔；抗小鼠；抗大鼠）100微克Test test PH7.2 for the inhibitor test測(cè)試瓊脂PH7.2（抑制劑測(cè)試）人白血病抑制因子（LIF）ELISA試劑盒,

MAPK（抗人；抗兔；抗小鼠；抗大鼠）100微克Test test PH8.0for the inhibitor test測(cè)試瓊脂PH8.0（抑制劑測(cè)試）人卷曲蛋白8（FZD8）ELISA試劑盒,

CYTOCHROME C（抗人；抗兔；抗小鼠；抗大鼠）100微克Tetrathionate enrichment broth( base) acc.to MULLER-KAUFFMAN人結(jié)蛋白（Des）ELISA試劑盒,

BRDU（抗人；抗兔；抗小鼠；抗大鼠）100微克TGE agar Tryptone glucose extract agarTCE 瓊脂/胰蛋白胨葡萄糖瓊脂大鼠環(huán)磷鳥(niǎo)（cGMP）ELISA試劑盒,

H4-K4三甲基100微克THAYER-MARTIN agar base THAYER-MARTIN瓊脂基礎(chǔ)/奈瑟氏菌選擇培養(yǎng)基大鼠內(nèi)皮型一氧化氮合成3（eNOS-3）ELISA試劑盒,

H4-K4乙?；?00微克THAYER-MARTIN supplement1( VCT inhibitor combination)植物磷脂酰甘油（PG）ELISA試劑盒,

免疫化學(xué)檢測(cè)試劑專題THAYER-MARTIN添加劑1/奈瑟氏菌選擇培養(yǎng)添加劑1（抑制劑）肌氨鹽鹽

名稱規(guī)格孟加拉紅氯素瓊脂D-亮氨醇

通用細(xì)胞載玻片制備試劑盒50次DRBC Agar (Dichloran Rose Bengal Chloramphenicol)1,4-二羥基萘
PK 進(jìn)口檢測(cè)試劑盒酮咯氨丁三癌胚抗原單克隆抗體（檢測(cè)）紫檀芪

酮咯氨丁三（標(biāo)準(zhǔn)品）癌基因c-Raf抗體紫菀酮

Ⅲ型膠原蛋白/膠原蛋白3/3型膠原蛋白抗體紫云英

黑色素瘤相關(guān)抗原抗體棕櫚

CD33抗體棕櫚甲酯

（標(biāo)準(zhǔn)品）睫狀神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子受體α抗體棕櫚乙酯

拉帕替尼CD7抗體棕矢車菊素

拉帕替尼尾型同源盒轉(zhuǎn)錄因子2抗體醉椒素