檢測程序：

1.  加樣：每孔各加入標準品或待測樣品 100ul ，將反應板充分混勻后置 37 ℃ 120 分鐘。

2.  洗板：用洗滌液將反應板充分洗滌 4-6 次，向濾紙上印干。

3.  每孔中加入抗體工作液10 0ul 。將反應板充分混勻后置 37 ℃ 6 0 分鐘。

4.  洗板：同前。

5.  每孔加酶標抗體工作液100ul 。將反應板置 37 ℃ 3 0 分鐘。

6.  洗板：同前。

7.  每孔加入底物工作液100ul ，置 37 ℃ 暗處反應15 分鐘。

8.  每孔加入100ul 終止液混勻。

9.  30分鐘內(nèi)用酶標儀在 45 0 nm 處測 吸光值。

檢測目的：用于測定血清，血漿及相關(guān)液體等樣本。例如適合檢測包括血清、血漿、尿液、胸腹水、灌洗液、腦脊液、細胞培養(yǎng)上清、組織勻漿等標本..需要而未提供

產(chǎn)品全稱：MUC5B 進口檢測試劑盒

英文名稱：MUC5B ELISA Kit

產(chǎn)品貨號：A096903

規(guī)格：48T/96T

服務(wù)：公司產(chǎn)品僅用于科研可提供免費代測服務(wù)，以及產(chǎn)品說明書和技術(shù)指導等

保存環(huán)境：2-8℃低溫、避光、防潮

主要成分：酶標板,試劑,標準品等

試劑盒組成及試劑配制 ：

樣本實驗前準備：

ELISA試劑盒液體樣本：包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細胞培養(yǎng)上清等。

（1）血清

室溫血液自然凝固10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應再次離心。

（2）血漿：

應根據(jù)標本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應再次離心。

（3）尿液：

用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實行。

（4）細胞培養(yǎng)上清：

檢測分泌性的成份時，用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細收集上清。

（5）培養(yǎng)細胞

檢測細胞內(nèi)的成份時，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細胞懸液，細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復凍融或加入組織蛋白萃取試劑，以使細胞破壞并放出細胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應再次離心。

（6）組織標本

切割標本后，稱取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。標本融化后仍然保?-8℃的溫度。加入一定量的PBS（PH7.4），或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標本勻漿化。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細收集上清。分裝后一份待檢測，其余冷凍備用。
操作流程：

（1）待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl，每種樣品設(shè)3個平行孔；設(shè)兩個陰性對照孔，每孔加未處理組的細胞裂解液100μl；另設(shè)一個空白對照孔，加入純細胞裂解液100μl。

（2）酶標板置4℃，包被過夜。

（3）洗板：吸干孔內(nèi)反應液，用洗滌液過洗一遍（將洗滌液注滿板孔后，即甩去），之后將洗滌液注滿板孔，浸泡1-2分鐘，間歇搖動。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復洗滌3-4次。

（4）陰性對照孔每孔加入PBS 50μl，樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。

（5）酶標板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi)，孵育60min。

（6）洗板，同（4）。

（7）每孔加1:5000稀釋的HRP-標記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。

（8）酶標板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi)，孵育60min。

（9）洗板，同（4）。

（10）每孔加TMB顯色液 100μl，輕輕混勻10s，置37℃暗處反應15-20min。

（11）每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應。

（12）分別測450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2，最終測得的OD值為兩者之差（W1-W2），以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。

（13）數(shù)據(jù)處理：在得出標本（S）和陰性對照（N）的 OD值后，計算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標準。

冰凍切片組織BAD蛋白表達NBT顯色光學顯微鏡檢測試劑盒10/20次人口腔角質(zhì)cDNABOC-L-苯丙氨醇

石蠟切片組織BAD蛋白表達NBT顯色光學顯微鏡檢測試劑盒10/20次人牙齦成纖維cDNACon A瓊脂糖凝膠4B

細胞BAD蛋白表達比色法定量檢測試劑盒10/50 次人牙周膜成纖維cDNA無水氯化金

細胞BAD蛋白表達熒光定量檢測試劑盒10/50 次人食道上皮cDNA人克拉拉蛋白（CC16） ELISA試劑盒, CC16  ELISA kit

BAD蛋白表達西方雜交分析試劑盒5次人食道平滑肌cDNA人脂肪結(jié)合蛋白（FABP）ELISA試劑盒, FABP ELISA

BAD蛋白免疫共沉淀分析試劑盒5次人腸微血管內(nèi)皮cDNA人腺三磷結(jié)合盒轉(zhuǎn)運體A1（ABCA1）ELISA試劑盒, ABCA1 ELISA

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細胞BAX蛋白表達流式細胞儀檢測試劑盒10/20次人結(jié)腸平滑肌cDNA小鼠磷化蛋白激C（P-PKC）ELISA試劑盒,

載玻片細胞BAX蛋白表達熒光顯微鏡檢測試劑盒10/20次人肺微血管內(nèi)皮cDNA小鼠醇結(jié)合蛋白4（RBP-4）ELISA試劑盒,

冰凍切片組織BAX蛋白表達熒光顯微鏡檢測試劑盒10/20次人肺動脈內(nèi)皮cDNA大鼠c-fos ELISA試劑盒,

石蠟切片組織BAX蛋白表達熒光顯微鏡檢測試劑盒10/20次人肺動脈平滑肌cDNA大鼠Smad7 ELISA試劑盒,

載玻片細胞BAX蛋白表達NBT顯色光學顯微鏡檢測試劑盒10/20次人肺動脈成纖維cDNA大鼠解整合素樣金屬蛋白8（ADAM8）ELISA試劑盒,

冰凍切片組織BAX蛋白表達NBT顯色光學顯微鏡檢測試劑盒10/20次人肺泡上皮cDNA大鼠CD30分子（CD30）ELISA試劑盒,

石蠟切片組織BAX蛋白表達NBT顯色光學顯微鏡檢測試劑盒10/20次人支氣管上皮cDNA大鼠神經(jīng)營養(yǎng)因子4（NT-4）ELISA試劑盒,

細胞BAX蛋白表達比色法定量檢測試劑盒10/50 次人氣管上皮cDNA豚鼠卵清蛋白特異性IgE（OVA sIgE）ELISA試劑盒,
MUC5B 進口檢測試劑盒硫核糖素肌側(cè)索硬化癥相關(guān)蛋白2（2號染色體）抗體輪環(huán)藤堿

利福布丁三磷腺檸檬裂解抗體輪環(huán)藤寧

利福布丁β淀粉樣蛋白前體結(jié)合蛋白B-1抗體羅丹明B

利福布丁內(nèi)收蛋白a1抗體羅漢果III

利福布?。藴势罚?/span>α2纖溶色素上皮衍生因子抗體羅漢果IV

膜粘連蛋白7抗體羅漢果VI

早老素γ分泌抗體羅漢果黃素

鈉ATP蛋白a1抗體羅漢果皂ⅡA2