檢測(cè)程序：

1.  加樣：每孔各加入標(biāo)準(zhǔn)品或待測(cè)樣品 100ul ，將反應(yīng)板充分混勻后置 37 ℃ 120 分鐘。

2.  洗板：用洗滌液將反應(yīng)板充分洗滌 4-6 次，向?yàn)V紙上印干。

3.  每孔中加入抗體工作液10 0ul 。將反應(yīng)板充分混勻后置 37 ℃ 6 0 分鐘。

4.  洗板：同前。

5.  每孔加酶標(biāo)抗體工作液100ul 。將反應(yīng)板置 37 ℃ 3 0 分鐘。

6.  洗板：同前。

7.  每孔加入底物工作液100ul ，置 37 ℃ 暗處反應(yīng)15 分鐘。

8.  每孔加入100ul 終止液混勻。

9.  30分鐘內(nèi)用酶標(biāo)儀在 45 0 nm 處測(cè) 吸光值。

檢測(cè)目的：用于測(cè)定血清，血漿及相關(guān)液體等樣本。例如適合檢測(cè)包括血清、血漿、尿液、胸腹水、灌洗液、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清、組織勻漿等標(biāo)本..需要而未提供

產(chǎn)品全稱：F13B 檢測(cè)試劑盒

英文名稱：Human F13B ELISA Kit

產(chǎn)品貨號(hào)：A097886

規(guī)格：48T/96T

服務(wù)：公司產(chǎn)品僅用于科研可提供免費(fèi)代測(cè)服務(wù)，以及產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)和技術(shù)指導(dǎo)等

保存環(huán)境：2-8℃低溫、避光、防潮

主要成分：酶標(biāo)板,試劑,標(biāo)準(zhǔn)品等

試劑盒組成及試劑配制 ：

樣本實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備：

ELISA試劑盒液體樣本：包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清等。

（1）血清

室溫血液自然凝固10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。

（2）血漿：

應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。

（3）尿液：

用無(wú)菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實(shí)行。

（4）細(xì)胞培養(yǎng)上清：

檢測(cè)分泌性的成份時(shí)，用無(wú)菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。

（5）培養(yǎng)細(xì)胞

檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí)，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細(xì)胞懸液，細(xì)胞濃度達(dá)到100萬(wàn)/ml左右。通過(guò)反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃取試劑，以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。

（6）組織標(biāo)本

切割標(biāo)本后，稱取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS（PH7.4），或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿化。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測(cè)，其余冷凍備用。
操作流程：

（1）待測(cè)樣品孔中每孔加入待測(cè)樣品100μl，每種樣品設(shè)3個(gè)平行孔；設(shè)兩個(gè)陰性對(duì)照孔，每孔加未處理組的細(xì)胞裂解液100μl；另設(shè)一個(gè)空白對(duì)照孔，加入純細(xì)胞裂解液100μl。

（2）酶標(biāo)板置4℃，包被過(guò)夜。

（3）洗板：吸干孔內(nèi)反應(yīng)液，用洗滌液過(guò)洗一遍（將洗滌液注滿板孔后，即甩去），之后將洗滌液注滿板孔，浸泡1-2分鐘，間歇搖動(dòng)。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復(fù)洗滌3-4次。

（4）陰性對(duì)照孔每孔加入PBS 50μl，樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。

（5）酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi)，孵育60min。

（6）洗板，同（4）。

（7）每孔加1:5000稀釋的HRP-標(biāo)記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。

（8）酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi)，孵育60min。

（9）洗板，同（4）。

（10）每孔加TMB顯色液 100μl，輕輕混勻10s，置37℃暗處反應(yīng)15-20min。

（11）每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應(yīng)。

（12）分別測(cè)450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2，最終測(cè)得的OD值為兩者之差（W1-W2），以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。

（13）數(shù)據(jù)處理：在得出標(biāo)本（S）和陰性對(duì)照（N）的 OD值后，計(jì)算S/N值。S/N≥2.1為陽(yáng)性判定標(biāo)準(zhǔn)。

大鼠內(nèi)皮1(ET-1)檢測(cè)試劑盒Tris-HCl緩沖液(1mol/L,pH8.0,無(wú)菌)L-天冬氨雙芐酯對(duì)苯磺鹽 98%氟-1,1,1,3,3,3-六氟異 98%

大鼠血管舒緩激肽(BK)檢測(cè)試劑盒Tris-HCl緩沖液(1mol/L,pH8.0)N-乙酰甘氨 98%N,N`-二苯硫脲 CP,98%

大鼠血管舒緩激肽(BK)檢測(cè)試劑盒Tris-HCl緩沖液(1mol/L,pH8.0)L-氨 98%三乙 99%

大鼠抵抗(Resistin)檢測(cè)試劑盒Tris-HCl緩沖液(1mol/L,pH8.8)(3H-1,2,3-三唑并[4,5-b]吡啶-3-氧)三-1-吡咯烷六氟磷鹽  0.98

大鼠抵抗(Resistin)檢測(cè)試劑盒Tris-HCl緩沖液(1mol/L,pH8.8)N-乙酰-L-脯氨 98%0.99

大鼠催乳(PRL)檢測(cè)試劑盒Tris-HCl緩沖液(0.5mol/L,pH6.8)S-乙酰半胱氨鹽 99%乙異烯酯 99%

大鼠催乳(PRL)檢測(cè)試劑盒Tris-HCl緩沖液(0.5mol/L,pH6.8)L-2-氨丁 99%硫化鋅 99.99% metals basis,3.8-4.2μm,powder

大鼠促生長(zhǎng)激釋放激(GRH)檢測(cè)試劑盒Tris-HCl緩沖液(0.05mol/L,pH7.4)7-氨-4- 98% 二溴 99%

大鼠促生長(zhǎng)激釋放激(GRH)檢測(cè)試劑盒Tris緩沖液(0.05mol/L,pH8.0)7-氨-4- ≥99%(HPLC),laser grade溴烷 >99.0%(GC)

大鼠促上腺皮質(zhì)激(ACTH)檢測(cè)試劑盒Tris鎂鹽緩沖液(1×,pH7.8)DL-精氨 98%硫鎳銨，六水 CP，98.0%

大鼠促上腺皮質(zhì)激(ACTH)檢測(cè)試劑盒Tris鎂鹽緩沖液(10×,pH7.8)L-精氨酰 98%苯酰 CP

大鼠促卵泡(FSH)檢測(cè)試劑盒Tris-蔗糖溶液(10%)D-天冬酰,一水 99%苯酰 99%

大鼠促卵泡(FSH)檢測(cè)試劑盒Triton X-100溶液(1%)N-乙酰-L-色氨 98%苯酰 99.5%，升華純化

大鼠雌二受體(ER)檢測(cè)試劑盒Triton X-100溶液(10%)D-2-氨丁 99%硫聯(lián)氨 CP,98.0%

大鼠雌二受體(ER)檢測(cè)試劑盒Triton X-100溶液(10%,無(wú)菌)L-精氨酯  98%擰蓋機(jī) SG-1550型手持式

大鼠前心鈉肽(Pro-ANP)檢測(cè)試劑盒X-gal(20mg/ml)芴氧羰-L-天冬氨-1-叔丁酯 99%鋼板鍘刀
F13B 檢測(cè)試劑盒鄰硝苯標(biāo)準(zhǔn)溶液(1000μg/ml,溶劑：甲)嗜中性粒胞漿因子4抗體青素

壬基酚(標(biāo)準(zhǔn)品)磷化核因子NF-κB p65抗體青素溶液

N-二乙基亞硝(標(biāo)準(zhǔn)品)磷化一氧化氮合成3（內(nèi)皮型）抗體青素兩性素B溶液

壬(分析標(biāo)準(zhǔn)品,>99.5%(GC))核抑制蛋白磷1抗體青素新素溶液

鉛單元素溶液標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)(1000μg/mL,基體: 1%HNO3)NCK銜接蛋白1抗體土素

(R)-(+)-苧烯(用于萜烯分析,>99.0%(GC))α-中連蛋白抗體土素

(R)-(+)-苧烯(用于萜烯分析,>99.0%(GC))核受體