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產(chǎn)品型號(hào)48T/96T
品 牌
廠商性質(zhì)經(jīng)銷商
所 在 地上海市
更新時(shí)間:2022-04-14 22:08:57瀏覽次數(shù):435次
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產(chǎn)品全稱:GC 進(jìn)口檢測(cè)試劑盒
英文名稱:GC ELISA Kit
產(chǎn)品貨號(hào):A097026
規(guī)格:48T/96T
服務(wù):公司產(chǎn)品僅用于科研可提供免費(fèi)代測(cè)服務(wù),以及產(chǎn)品說(shuō)明書和技術(shù)指導(dǎo)等
保存環(huán)境:2-8℃低溫、避光、防潮
主要成分:酶標(biāo)板,試劑,標(biāo)準(zhǔn)品等
檢測(cè)目的:用于測(cè)定血清,血漿及相關(guān)液體等樣本。例如適合檢測(cè)包括血清、血漿、尿液、胸腹水、灌洗液、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清、組織勻漿等標(biāo)本..需要而未提供
試劑盒組成及試劑配制 :
1. 酶聯(lián)板(Assay plate ):一塊(96孔)。 2. 標(biāo)準(zhǔn)品(Standard):2瓶(凍干品)。 3. 樣品稀釋液(Sample Diluent):1×20ml/瓶。 4. 標(biāo)記抗體稀釋液(Biotin-antibody Diluent):1×10ml/瓶。 5. 辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素稀釋液 (HRP-avidin Diluent):1×10ml/瓶。 6. 標(biāo)記抗體(Biotin-antibody):1×120μl/瓶(1:100) 7. 辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素(HRP-avidin):1×120μl/瓶(1:100) 8. 底物溶液(TMB Substrate):1×10ml/瓶。 9. 濃洗滌液(Wash Buffer):1×20ml/瓶,使用時(shí)每瓶用蒸餾水稀釋25倍。 10. 終止液(Stop Solution):1×10ml/瓶(2N H2SO4)。 |
樣本實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備:
ELISA試劑盒液體樣本:包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清等。
(1)血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(2)血漿:
應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(3)尿液:
用無(wú)菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實(shí)行。
(4)細(xì)胞培養(yǎng)上清:
檢測(cè)分泌性的成份時(shí),用無(wú)菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。
(5)培養(yǎng)細(xì)胞
檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí),用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液,細(xì)胞濃度達(dá)到100萬(wàn)/ml左右。通過反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(6)組織標(biāo)本
切割標(biāo)本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測(cè),其余冷凍備用。
操作流程:
(1)待測(cè)樣品孔中每孔加入待測(cè)樣品100μl,每種樣品設(shè)3個(gè)平行孔;設(shè)兩個(gè)陰性對(duì)照孔,每孔加未處理組的細(xì)胞裂解液100μl;另設(shè)一個(gè)空白對(duì)照孔,加入純細(xì)胞裂解液100μl。
(2)酶標(biāo)板置4℃,包被過夜。
(3)洗板:吸干孔內(nèi)反應(yīng)液,用洗滌液過洗一遍(將洗滌液注滿板孔后,即甩去),之后將洗滌液注滿板孔,浸泡1-2分鐘,間歇搖動(dòng)。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復(fù)洗滌3-4次。
(4)陰性對(duì)照孔每孔加入PBS 50μl,樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。
(5)酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(6)洗板,同(4)。
(7)每孔加1:5000稀釋的HRP-標(biāo)記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。
(8)酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(9)洗板,同(4)。
(10)每孔加TMB顯色液 100μl,輕輕混勻10s,置37℃暗處反應(yīng)15-20min。
(11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應(yīng)。
(12)分別測(cè)450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,最終測(cè)得的OD值為兩者之差(W1-W2),以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
(13)數(shù)據(jù)處理:在得出標(biāo)本(S)和陰性對(duì)照(N)的 OD值后,計(jì)算S/N值。S/N≥2.1為陽(yáng)性判定標(biāo)準(zhǔn)。
檢測(cè)程序:
1. 加樣:每孔各加入標(biāo)準(zhǔn)品或待測(cè)樣品 100ul ,將反應(yīng)板充分混勻后置 37 ℃ 120 分鐘。
2. 洗板:用洗滌液將反應(yīng)板充分洗滌 4-6 次,向?yàn)V紙上印干。
3. 每孔中加入抗體工作液10 0ul 。將反應(yīng)板充分混勻后置 37 ℃ 6 0 分鐘。
4. 洗板:同前。
5. 每孔加酶標(biāo)抗體工作液100ul 。將反應(yīng)板置 37 ℃ 3 0 分鐘。
6. 洗板:同前。
7. 每孔加入底物工作液100ul ,置 37 ℃ 暗處反應(yīng)15 分鐘。
8. 每孔加入100ul 終止液混勻。
9. 30分鐘內(nèi)用酶標(biāo)儀在 45 0 nm 處測(cè) 吸光值。
石蠟切片免疫組織化學(xué)HRP聯(lián)DAB*間接檢測(cè)試劑盒10次EE Broth Mossel溴化金
(含一抗和HRP二抗)RVS大豆肉湯人肺癌標(biāo)志物DR-70(DR-70TM)ELISA試劑盒,DR-70TM ELISA kit
石蠟切片免疫組織化學(xué)HRP聯(lián)DAB直接檢測(cè)試劑盒(含HRP一抗)10次RVS Soy Broth人乙酰肝素(HPA)ELISA試劑盒,HPA ELISA kit
石蠟切片免疫組織化學(xué)AP聯(lián)NBT/BCIP基礎(chǔ)檢測(cè)試劑盒(無(wú)一抗和二抗)50次XLD瓊脂人抗存活素抗體/生存蛋白(Surv)ELISA試劑盒,Surv ELISA kit
石蠟切片免疫組織化學(xué)AP聯(lián)NBT/BCIP間接檢測(cè)試劑盒(含AP二抗)20次XLD Agar人抗肌內(nèi)膜抗體IgA(EMA IgA)ELISA試劑盒,EMA IgA ELISA
石蠟切片免疫組織化學(xué)AP聯(lián)NBT/BCIP*間接檢測(cè)試劑盒10次溴棕三甲銨瓊脂人衣原體蛋白樣活性因子(CPAF)ELISA試劑盒, CPAF ELISA
(含一抗和AP二抗)Cetrimide Agar Base人流感病抗體IgG(FLU)ELISA試劑盒,FLU ELISA
石蠟切片免疫組織化學(xué)AP聯(lián)NBT/BCIP直接檢測(cè)試劑盒(含AP一抗)10次甘露鹽瓊脂人雌激素受體(ER)ELISA試劑盒,ER ELISA
石蠟切片免疫熒光顯微鏡基礎(chǔ)檢測(cè)試劑盒(無(wú)一抗和二抗)50次Mannitol Salt Agar人3-羥基-3-甲基戊二酰合1(HMGCS1)ELISA試劑盒,HMGCS1 ELISA
石蠟切片免疫熒光顯微鏡間接檢測(cè)試劑盒(含熒光二抗)20次梭菌強(qiáng)化培養(yǎng)基人磷烯醇式丙酮羧激(PCK)ELISA試劑盒,
石蠟切片免疫熒光顯微鏡*間接檢測(cè)試劑盒(含一抗和熒光二抗)10次Reinforced Clostridial Medium人OJ抗體/抗異亮氨酰tRNA合成抗體(OJ/IleRS)ELISA試劑盒,
石蠟切片免疫熒光顯微鏡直接檢測(cè)試劑盒(含熒光一抗)10次哥倫比亞瓊脂人C(VC)ELISA試劑盒,
TEM電鏡石蠟切片免疫組織化學(xué)HRP聯(lián)DAB基礎(chǔ)檢測(cè)試劑盒50次Columbia Agar人抗復(fù)合物(TAT)ELISA試劑盒,
(無(wú)一抗和二抗)沙氏葡萄糖肉湯人胰高血糖素樣肽1(GLP-1)ELISA試劑盒,
TEM電鏡石蠟切片免疫組織化學(xué)HRP聯(lián)DAB間接檢測(cè)試劑盒(含HRP二抗)20次Sabouraud Dextrose Broth人皮膚蛋白(DPT)ELISA試劑盒,
GC 進(jìn)口檢測(cè)試劑盒洛匹那韋22號(hào)染色體開放閱讀框29抗體10-羥基攀援山橙堿
洛匹那韋神經(jīng)表面蛋白F310-羥基
洛匹那韋(標(biāo)準(zhǔn)品)組織蛋白C抗體10-羥基
半胱蛋白蛋白-4抗體10-去乙酰紫杉;7-表-去乙?;仙?/span>
活化半胱蛋白蛋白3抗體10-脫乙酰巴卡亭
7號(hào)染色體開放閱讀框61抗體11-O-羅漢果V
少突膠質(zhì)跨膜蛋白抗體11-羥基柳杉酚
(標(biāo)準(zhǔn)品)激分子B7-1蛋白抗體11-羰基-Β-乙酰乳香
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