檢測(cè)程序：

1.  加樣：每孔各加入標(biāo)準(zhǔn)品或待測(cè)樣品 100ul ，將反應(yīng)板充分混勻后置 37 ℃ 120 分鐘。

2.  洗板：用洗滌液將反應(yīng)板充分洗滌 4-6 次，向?yàn)V紙上印干。

3.  每孔中加入抗體工作液10 0ul 。將反應(yīng)板充分混勻后置 37 ℃ 6 0 分鐘。

4.  洗板：同前。

5.  每孔加酶標(biāo)抗體工作液100ul 。將反應(yīng)板置 37 ℃ 3 0 分鐘。

6.  洗板：同前。

7.  每孔加入底物工作液100ul ，置 37 ℃ 暗處反應(yīng)15 分鐘。

8.  每孔加入100ul 終止液混勻。

9.  30分鐘內(nèi)用酶標(biāo)儀在 45 0 nm 處測(cè) 吸光值。

檢測(cè)目的：用于測(cè)定血清，血漿及相關(guān)液體等樣本。例如適合檢測(cè)包括血清、血漿、尿液、胸腹水、灌洗液、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清、組織勻漿等標(biāo)本..需要而未提供

產(chǎn)品全稱：AnnexinA5 檢測(cè)試劑盒

英文名稱：Human Annexin A5 ELISA Kit

產(chǎn)品貨號(hào)：A097981

規(guī)格：48T/96T

服務(wù)：公司產(chǎn)品僅用于科研可提供免費(fèi)代測(cè)服務(wù)，以及產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)和技術(shù)指導(dǎo)等

保存環(huán)境：2-8℃低溫、避光、防潮

主要成分：酶標(biāo)板,試劑,標(biāo)準(zhǔn)品等

試劑盒組成及試劑配制 ：

樣本實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備：

ELISA試劑盒液體樣本：包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清等。

（1）血清

室溫血液自然凝固10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。

（2）血漿：

應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。

（3）尿液：

用無(wú)菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實(shí)行。

（4）細(xì)胞培養(yǎng)上清：

檢測(cè)分泌性的成份時(shí)，用無(wú)菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。

（5）培養(yǎng)細(xì)胞

檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí)，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細(xì)胞懸液，細(xì)胞濃度達(dá)到100萬(wàn)/ml左右。通過(guò)反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃取試劑，以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。

（6）組織標(biāo)本

切割標(biāo)本后，稱取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS（PH7.4），或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿化。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測(cè)，其余冷凍備用。
操作流程：

（1）待測(cè)樣品孔中每孔加入待測(cè)樣品100μl，每種樣品設(shè)3個(gè)平行孔；設(shè)兩個(gè)陰性對(duì)照孔，每孔加未處理組的細(xì)胞裂解液100μl；另設(shè)一個(gè)空白對(duì)照孔，加入純細(xì)胞裂解液100μl。

（2）酶標(biāo)板置4℃，包被過(guò)夜。

（3）洗板：吸干孔內(nèi)反應(yīng)液，用洗滌液過(guò)洗一遍（將洗滌液注滿板孔后，即甩去），之后將洗滌液注滿板孔，浸泡1-2分鐘，間歇搖動(dòng)。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復(fù)洗滌3-4次。

（4）陰性對(duì)照孔每孔加入PBS 50μl，樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。

（5）酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi)，孵育60min。

（6）洗板，同（4）。

（7）每孔加1:5000稀釋的HRP-標(biāo)記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。

（8）酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi)，孵育60min。

（9）洗板，同（4）。

（10）每孔加TMB顯色液 100μl，輕輕混勻10s，置37℃暗處反應(yīng)15-20min。

（11）每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應(yīng)。

（12）分別測(cè)450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2，最終測(cè)得的OD值為兩者之差（W1-W2），以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。

（13）數(shù)據(jù)處理：在得出標(biāo)本（S）和陰性對(duì)照（N）的 OD值后，計(jì)算S/N值。S/N≥2.1為陽(yáng)性判定標(biāo)準(zhǔn)。

趨化因子C-X3-C-元配體1(CX3CL1)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒水楊可溶性淀粉 AR(S)-(+)-2-氨-1-丁 98%

生長(zhǎng)調(diào)節(jié)致癌因α(GROα/CXCL1)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒  水楊可溶性淀粉 ACS(R)-(-)-2-氨-1-丁 98%

上皮中性?；罨?/span>78(ENA-78)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒 水蘇糖水溶性淀粉 水溶性,藥用級(jí)2--4'-聯(lián)苯 98%

粒趨化蛋白2(GCP-2)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒水蘇糖可溶性淀粉 藥用級(jí)0.98

白介8(IL-8)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒水蘇糖二乙二丁  99%0.99

抗載脂蛋白抗體(AAHA)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒玉米淀粉二乙二丁 standard for GC, ≥99.5% (GC)  97%

10kDa干擾γ誘導(dǎo)蛋白(IP-10/CXCL10)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒DL-異檸檬三鈉鹽二乙二丁 用于表面活性劑分析，99.5%環(huán)氧烷  99%

干擾誘導(dǎo)Tα亞族趨化因子 (I-TAC)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒DL-異檸檬三鈉鹽二乙二丁 CP環(huán)氧烷  CP

質(zhì)衍生因子1(SDF-1)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒焦磷鈉乙二丁 98%環(huán)氧烷  99.5%

B-淋巴趨化因子(BLC)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒 焦磷二乙二單 GR,99.0%環(huán)氧烷  分析標(biāo)準(zhǔn)品，≥99.7% (GC)

趨化因子CXC配體16(CXCL16)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒葡糖內(nèi)酯二乙二單 standard for GC四羥硫磷 75%水溶液

胱抑C(Cys-C)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒葡糖內(nèi)酯二乙二單 98%鈣 AR， ≥99.0% (RT)

色C(Cyt-C)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒甜蜜二乙二乙 99.0% AR,50 % in H2O

Dickkopf相關(guān)蛋白1 (DKK1)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒甜蜜二乙二丁醋酯 98%鈉 AR,99.0%

二肽肽IV(DPP4)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒D-葡萄糖溶液二乙二單乙醋酯 99%鈉 CP,98.0%

表皮生長(zhǎng)因子(EGF)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒D-葡萄糖溶液二 98%烯酰氧三(三硅氧烷)硅烷 97%
AnnexinA5 檢測(cè)試劑盒(S)-(+)-α-甲氧基(>98.0%(GC)(T))原鈣粘蛋白γA3抗體2,4-二氯苯氧乙

(S)-(+)-α-甲氧基(>98.0%(GC)(T))血小板源性生長(zhǎng)因子BB抗體2,4-二氯苯氧乙鈉

(R)-(-)-α-甲氧基(>98.0%(GC)(T))胰島素促進(jìn)因子抗體（胰十二指腸同源異型盒蛋白）2,4-二氯苯氧乙鈉

(R)-(-)-α-甲氧基(>98.0%(GC)(T))乙?；疨53(Lys382)抗體2,4-二氯苯氧乙鈉

(R)-(-)-α-甲氧基(>98.0%(GC)(T))磷化過(guò)氧化活化增生受