產(chǎn)品全稱(chēng)：ANA 進(jìn)口檢測(cè)試劑盒

英文名稱(chēng)：ANA ELISA Kit

產(chǎn)品貨號(hào)：A096849

規(guī)格：48T/96T

服務(wù)：公司產(chǎn)品僅用于科研可提供免費(fèi)代測(cè)服務(wù)，以及產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)和技術(shù)指導(dǎo)等

保存環(huán)境：2-8℃低溫、避光、防潮

主要成分：酶標(biāo)板,試劑,標(biāo)準(zhǔn)品等

檢測(cè)目的：用于測(cè)定血清，血漿及相關(guān)液體等樣本。例如適合檢測(cè)包括血清、血漿、尿液、胸腹水、灌洗液、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清、組織勻漿等標(biāo)本..需要而未提供

試劑盒組成及試劑配制 ：

樣本實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備：

ELISA試劑盒液體樣本：包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清等。

（1）血清

室溫血液自然凝固10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。

（2）血漿：

應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。

（3）尿液：

用無(wú)菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實(shí)行。

（4）細(xì)胞培養(yǎng)上清：

檢測(cè)分泌性的成份時(shí)，用無(wú)菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。

（5）培養(yǎng)細(xì)胞

檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí)，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細(xì)胞懸液，細(xì)胞濃度達(dá)到100萬(wàn)/ml左右。通過(guò)反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃取試劑，以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。

（6）組織標(biāo)本

切割標(biāo)本后，稱(chēng)取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS（PH7.4），或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿化。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測(cè)，其余冷凍備用。
操作流程：

（1）待測(cè)樣品孔中每孔加入待測(cè)樣品100μl，每種樣品設(shè)3個(gè)平行孔；設(shè)兩個(gè)陰性對(duì)照孔，每孔加未處理組的細(xì)胞裂解液100μl；另設(shè)一個(gè)空白對(duì)照孔，加入純細(xì)胞裂解液100μl。

（2）酶標(biāo)板置4℃，包被過(guò)夜。

（3）洗板：吸干孔內(nèi)反應(yīng)液，用洗滌液過(guò)洗一遍（將洗滌液注滿(mǎn)板孔后，即甩去），之后將洗滌液注滿(mǎn)板孔，浸泡1-2分鐘，間歇搖動(dòng)。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復(fù)洗滌3-4次。

（4）陰性對(duì)照孔每孔加入PBS 50μl，樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。

（5）酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi)，孵育60min。

（6）洗板，同（4）。

（7）每孔加1:5000稀釋的HRP-標(biāo)記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。

（8）酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi)，孵育60min。

（9）洗板，同（4）。

（10）每孔加TMB顯色液 100μl，輕輕混勻10s，置37℃暗處反應(yīng)15-20min。

（11）每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應(yīng)。

（12）分別測(cè)450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2，最終測(cè)得的OD值為兩者之差（W1-W2），以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。

（13）數(shù)據(jù)處理：在得出標(biāo)本（S）和陰性對(duì)照（N）的 OD值后，計(jì)算S/N值。S/N≥2.1為陽(yáng)性判定標(biāo)準(zhǔn)。

檢測(cè)程序：

1.  加樣：每孔各加入標(biāo)準(zhǔn)品或待測(cè)樣品 100ul ，將反應(yīng)板充分混勻后置 37 ℃ 120 分鐘。

2.  洗板：用洗滌液將反應(yīng)板充分洗滌 4-6 次，向?yàn)V紙上印干。

3.  每孔中加入抗體工作液10 0ul 。將反應(yīng)板充分混勻后置 37 ℃ 6 0 分鐘。

4.  洗板：同前。

5.  每孔加酶標(biāo)抗體工作液100ul 。將反應(yīng)板置 37 ℃ 3 0 分鐘。

6.  洗板：同前。

7.  每孔加入底物工作液100ul ，置 37 ℃ 暗處反應(yīng)15 分鐘。

8.  每孔加入100ul 終止液混勻。

9.  30分鐘內(nèi)用酶標(biāo)儀在 45 0 nm 處測(cè) 吸光值。

細(xì)胞培養(yǎng)液氧化應(yīng)激活性氧（ROS）比色法定量檢測(cè)試劑盒（超氧陰離子）100次貓腎；CRFK大鼠絲氨/蘇氨蛋白磷（STK）ELISA試劑盒,

植物氧化應(yīng)激活性氧（ROS）比色法定量檢測(cè)試劑盒（超氧陰離子）20次貓星形腦膠質(zhì)；PG-4(S+L-)大鼠凝聚素（CLU）ELISA試劑盒,

活體細(xì)胞氧化應(yīng)激活性氧（ROS）原位熒光染色試劑盒（羥自由基）20次貓腎；F81大鼠CD44分子（CD44）ELISA試劑盒,

冰凍切片氧化應(yīng)激活性氧（ROS）原位熒光染色試劑盒（羥自由基）20次貓腎；CRFK大鼠色素上皮衍生因子（PEDF）ELISA試劑盒,

細(xì)胞氧化應(yīng)激活性氧（ROS）比色法定量檢測(cè)試劑盒（羥自由基）20次家貓腎；CATK1大鼠卵泡抑素（FS）ELISA試劑盒,

組織氧化應(yīng)激活性氧（ROS）比色法定量檢測(cè)試劑盒（羥自由基）20次家貓肺；FCA-L1大鼠凝因子Ⅹ（FⅩ）ELISA試劑盒,

體液氧化應(yīng)激活性氧（ROS）比色法定量檢測(cè)試劑盒（羥自由基）20次家貓肺；FCA-L2大鼠丙酮激M2型同工（M2-PK）ELISA試劑盒,

酵母氧化應(yīng)激活性氧（ROS）比色法定量檢測(cè)試劑盒（羥自由基）20次家貓皮膚；FCA-S1大鼠內(nèi)皮抑素（ES）ELISA試劑盒,

植物氧化應(yīng)激活性氧（ROS）比色法定量檢測(cè)試劑盒（羥自由基）20次豹貓肺成纖維樣；LCL1大鼠FMS樣酪氨激3（Flt3）ELISA試劑盒,

細(xì)胞內(nèi)氧化應(yīng)激活性氧（ROS）紅色熒光測(cè)定試劑盒（超氧陰離子）20次豹貓肺成纖維樣；LCL2大鼠遲現(xiàn)抗原（VLA）ELISA試劑盒,

冰凍切片氧化應(yīng)激活性氧（ROS）紅色熒光測(cè)定試劑盒（超氧陰離子）50次豹貓肺成纖維樣；LCL3大鼠層連蛋白/板層素（LN）ELISA試劑盒,

細(xì)胞培養(yǎng)液氧化應(yīng)激活性氧（ROS）紅色熒光測(cè)定試劑盒（超氧陰離子）20次豹貓肺成纖維樣；LCL4大鼠粒巨噬集落激因子（GM-CSF）ELISA試劑盒,

真菌/酵母細(xì)胞內(nèi)氧化應(yīng)激活性氧（ROS）紅色熒光測(cè)定試劑盒20次豹貓肌肉成纖維樣；LCM4鴨白介素2（IL-2）ELISA試劑盒,

（超氧陰離子）豹貓皮膚成纖維樣；LCS5馬生長(zhǎng)激素（GH）ELISA試劑盒,

植物氧化應(yīng)激活性氧（ROS）紅色熒光測(cè)定試劑盒（超氧陰離子）20次猞猁皮膚成纖維樣；ELS1兔核因子κB亞基p65親和肽（NF-κB p65）ELISA試劑盒,
ANA 進(jìn)口檢測(cè)試劑盒鹽表素銜接蛋白α-Adaptin抗體番瀉元A

鹽表素凋亡蛋白活性因子-1抗體（C端）番瀉元B

鹽表素(標(biāo)準(zhǔn)品)凋亡蛋白活性因子-1抗體（N端）反式茴香腦

埃替非巴肽，依非巴特;安普利肽，依非巴肽三磷腺結(jié)合轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白G超家族成員2抗體芳樟

埃替非巴肽，依非巴特;安普利肽，依非巴肽載脂蛋白E抗體防己諾林堿

鹽埃羅替尼淀粉樣肽前體蛋白抗體飛蓬

鹽埃羅替尼水通道蛋白-2抗體飛蓬酯乙

鹽埃羅替尼血管緊張素原抗體非洲防己堿