特性及肌動(dòng)蛋白在細(xì)胞內(nèi)動(dòng)態(tài)分布

   我們對(duì)4種融合蛋白在細(xì)胞中的動(dòng)態(tài)分布進(jìn)行了72小時(shí)的連續(xù)觀察.在細(xì)胞質(zhì)中首先出現(xiàn)微弱的綠色熒光,隨著融合蛋白表達(dá)量的增加,綠色熒光在細(xì)胞質(zhì)中呈細(xì)絲狀,細(xì)絲逐漸縮短變粗,zui后變成點(diǎn)狀,此時(shí)細(xì)胞核內(nèi)沒(méi)有熒光分布.逐漸地,融合蛋白在細(xì)胞核周?chē)奂?表現(xiàn)為細(xì)胞核周?chē)臒晒廨^強(qiáng),接著融合蛋白進(jìn)入細(xì)胞核,表現(xiàn)為綠色熒光在細(xì)胞核和細(xì)胞質(zhì)中均有分布.這一結(jié)果表明,這4種細(xì)胞質(zhì)肌動(dòng)蛋白與GFP的融合蛋白表達(dá)后,均能進(jìn)入細(xì)胞核.

特性及肌動(dòng)蛋白在細(xì)胞內(nèi)動(dòng)態(tài)分布
   除了以上共同的分布規(guī)律外,α—肌動(dòng)蛋白—GFP融合蛋白和其它3種融合蛋白的分布規(guī)律有所區(qū)別.此種融合蛋白進(jìn)入細(xì)胞核后,細(xì)胞核內(nèi)的熒光比細(xì)胞質(zhì)內(nèi)熒光強(qiáng),有的細(xì)胞幾乎所有的熒光都集中在細(xì)胞核內(nèi).也就是說(shuō)α—肌動(dòng)蛋白—GFP融合蛋白較多地集中在細(xì)胞核內(nèi),而其它3種融合蛋白則是在細(xì)胞核和細(xì)胞質(zhì)內(nèi)均有較多的分布.通過(guò)4種肌動(dòng)蛋白的氨基酸序列比較分析,發(fā)現(xiàn)α—肌動(dòng)蛋白的一級(jí)結(jié)構(gòu)與其它3種肌動(dòng)蛋白存在一定程度的差異,這些差異可能導(dǎo)致它們?cè)诳臻g結(jié)構(gòu)和等電點(diǎn)上的區(qū)別.可能正是因?yàn)檫@些區(qū)別造成了它們進(jìn)核能力的不同,從而表現(xiàn)出不同的分布特點(diǎn).

    肌動(dòng)蛋白是真核細(xì)胞中普遍存在的一類(lèi)高度保守的蛋白質(zhì)家族.在肌肉細(xì)胞中肌動(dòng)蛋白作為肌絲的主要成分,參與肌肉的收縮運(yùn)動(dòng)；在非肌肉細(xì)胞中肌動(dòng)蛋白是構(gòu)成細(xì)胞質(zhì)骨架的主要成分,參與細(xì)胞運(yùn)動(dòng)、細(xì)胞分裂、維持細(xì)胞形態(tài)等生命活動(dòng).除了在細(xì)胞質(zhì)中發(fā)揮重要的生理功能以外,近年來(lái)已有較多研究結(jié)果證實(shí)肌動(dòng)蛋白還存在于細(xì)胞核中.人們推測(cè)肌動(dòng)蛋白在細(xì)胞核內(nèi)可能起著馬達(dá)分子的作用,參與染色體的折疊、包裝和RNA的轉(zhuǎn)錄運(yùn)輸.