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人透明質(zhì)酸,HAELISA試劑盒

時間:2012-12-17閱讀:469
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  人透明質(zhì)酸,HAELISA試劑盒使用說明書
  
  本試劑盒僅供研究使用公司實驗室提供免費代測,7個工作日出結(jié)果,提供原始數(shù)據(jù)!
  
  檢測范圍:每種的檢測范圍都有所不同,具體請查看說明書
  
  特異性:本試劑盒可同時檢測天然或重組的指標,且與其他相關(guān)蛋白無交叉反應。
  
  有效期:6個月
  
  預期應用:ELISA法檢測指標血清、血漿、細胞培養(yǎng)上清或其它相關(guān)生物液體中含量或靈敏度。
  
  HumanautoantibodiesagainsttheC-terminaldomainⅣ,ACAST-DⅣ人抗鈣蛋白酶抑素抗體(ACAST-DⅣ)ELISAit
  
  HumanovalbuminspecificIgE,OVAsIgE人卵清蛋白特異性IgE(OVAsIgE)
  
  Humananti-fibrillarinantibody,AFA/snoRNP/U3RNP人抗核仁纖維蛋白抗體(AFA/snoRNP/U3RNP)
  
  Humansystemiclupuserythematosus,SLE人系統(tǒng)性紅斑狼瘡(SLE)
  
  Humananti-gangliosideantibody,GM1人抗神經(jīng)節(jié)苷脂抗體(GM1)
  
  Humananti-myelinassociatedglycoproteinantibody,MAGAb人抗髓鞘相關(guān)糖蛋白抗體(MAGAb)
  
  Humananti-neutrophilgranulesantibody,ANGA人抗中性粒細胞顆粒抗體(ANGA)
  
  Humananti-neutrophilantibody,ANA人抗中性粒細胞抗體(ANA)
  
  Humananti-apolipoproteinA1antibody,ApoA1人抗載脂蛋白抗體A1(ApoA1)
  
  Humananti-insulinreceptorantibody,AIRA人抗胰島素受體抗體(AIRA)
  
  Humananti-gastricparietalcellantibody,AGPA/PCA人抗胃壁細胞抗體(AGPA/PCA)
  
  Humananti-gastricparietalcellantibody,AGPA/PCA人抗網(wǎng)硬蛋白抗體(ARA)
  
  Humananti-Reticulinantibody,ARA人抗網(wǎng)硬蛋白抗體(ARA)
  
  人透明質(zhì)酸,HAELISA試劑盒本品用純化的抗體包被微孔板,制成固相載體,往包被抗HVA抗體的微孔中依次加入標本或標準品、生物素化的抗HVA抗體、HRP標記的親和素,經(jīng)過*洗滌后用底物TMB顯色。TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的HVA呈正相關(guān)。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),計算樣品濃度。
  
  1.酶標儀(建議參考儀器使用說明提前預熱)
  
  2.微量加液器及吸頭,EP管
  
  3.蒸餾水或去離子水,全新濾紙
  
  實驗原理
  
  用純化的抗體包被微孔板,制成固相載體,往包被抗指標抗體的微孔中依次加入標本或標準品、生物素化的抗指標抗體、HRP標記的親和素,經(jīng)過*洗滌后用底物TMB顯色。TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的指標呈正相關(guān)。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),計算樣品濃度。
  
  人透明質(zhì)酸,HAELISA試劑盒試劑盒組成及試劑配制
  
  1.試劑盒保存:-20℃(較長時間不用時);2-8℃(頻繁使用時)。
  
  2.濃洗滌液低溫保存會有鹽析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶。
  
  3.中、英文說明書可能會有不一致之處,請以英文說明書為準。
  
  4.剛開啟的酶聯(lián)板孔中可能會含有少許水樣物質(zhì),此為正?,F(xiàn)象,不會對實驗結(jié)果造成任何影響。
  
  標本的采集及保存
  
  1.血清:全血標本請于室溫放置2小時或4℃過夜后于1000g離心20分鐘,取上清即可檢測,或?qū)吮痉庞?20℃或-80℃保存,但應避免反復凍融。
  
  2.血漿:可用EDTA或肝素作為抗凝劑,標本采集后30分鐘內(nèi)于2-8°C1000g離心15分鐘,或?qū)吮痉庞?20℃或-80℃保存,但應避免反復凍融。
  
  3.細胞培養(yǎng)物上清或其它生物標本:1000g離心20分鐘,取上清即可檢測,或?qū)吮痉庞?20℃或-80℃保存,但應避免反復凍融。
  
  注:標本溶血會影響zui后檢測結(jié)果,因此溶血標本不宜進行此項檢測。
  
  標本的稀釋原則:
  
  首先通過文獻檢索的方式了解待測樣本的大致含量,確定適當?shù)南♂尡稊?shù)。只有稀釋至標準曲線的范圍內(nèi),檢測的結(jié)果才是準確的。稀釋的過程中,應做好詳細的記錄。zui后計算濃度時,稀釋了“N”倍,標本的濃度應再乘以“N”。
  
  1.酶聯(lián)板(Assayplate):一塊(96孔)。
  
  2.標準品(Standard):2瓶。
  
  3.樣品稀釋液(SampleDiluent):1×20ml/瓶。
  
  4.生物素標記抗體稀釋液(Biotin-antibodyDiluent):1×10ml/瓶。
  
  5.辣根過氧化物酶標記親和素稀釋液(HRP-avidinDiluent):1×10ml/瓶。
  
  6.生物素標記抗體(Biotin-antibody):1×120μl/瓶(1:100)
  
  7.辣根過氧化物酶標記親和素(HRP-avidin):1×120μl/瓶(1:100)
  
  8.底物溶液(TMBSubstrate):1×10ml/瓶。
  
  9.濃洗滌液(WashBuffer):1×20ml/瓶,使用時每瓶用蒸餾水稀釋25倍。
  
  10.終止液(StopSolution):1×10ml/瓶(2NH2SO4)。

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